DNA提取中各類試劑的作用
點擊次數:267 更新時間:2023-09-27
Tris-HCL:緩沖體系。提供穩定pH;
NaCl:可以降低DNA在水中的溶解度,并且不破壞DNA的結構;
EDTA: Ca2+ Mg2+ 的螯合劑,抑制DNase活性;
SDS:使蛋白變性,促進蛋白質和DNA的分離;
巰基乙醇:抗氧化劑,防止酚氧化成醌,保護DNA;也有人說可以用來消泡;
醋cu酸鉀:鉀離子置換SDS的鈉離子,形成不溶于水的PDS,將大量蛋白同步沉淀下來。
氯仿:異戊醇:使蛋白變性。氯仿的作用是變性劑、抽提脂溶性物質;
異戊醇作用是A.降低表面張力、阻止氣泡的產生;B.有助于分相(使離心后水相、有機相穩定)
(劇烈震蕩時容易產生氣泡,氣泡會阻止相互間的充分作用);
異丙醇:沉淀DNA;
70%乙醇:洗滌DNA;(鹽、蛋白等溶于70%乙醇,而DNA不溶)
100%乙醇:可以用于沉淀DNA,也可以用于使DNA快速干燥