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葉綠體色素的提取和分離實驗
點擊次數:249 更新時間:2023-09-12

原理

葉綠體色素是植物吸收太陽光能進行光合作用的重要物質,主要由葉綠素a、葉綠素b、胡蘿卜素和葉黃素組成。從植物葉片中提取和分離色素是對其認識和了解的前提。利用葉綠體色素能溶于有機溶劑的特性,可用丙酮提取。分離色素的方法有多種,紙層析是其中最jian簡便的一種。當溶劑不斷地從層析濾紙上流過時,由于混合物中各成分在兩相(即流動相和固定相)間具有不同的分配系數,它們的移動速度不同,使樣品中的混合物得到分離。

儀器藥品

大試管 臺天平

研缽 量筒

燒杯 漏斗

軟木塞 新華濾紙

丙酮 四氯化碳

無水硫liu酸鈉 碳酸鈣

石英砂

操作步驟

1.稱取新鮮葉子2g,放入研缽中加丙酮5ml,少許碳酸鈣和石英砂,研磨成勻漿,再加丙酮5ml,然后以漏斗過濾之,即為色素提取液。

2.取準備好的濾紙條(2×20cm),將其一端剪去兩側,中間留一長約1.5cm,寬約0.5cm的窄條。

3.用毛細管取葉綠素溶液點于窄條的上方,注意一次所點溶液不可過多,如色素過淡,用電吹風吹干后再點1梍2次。

4.在大試管中加入四氯化碳3梍5ml及少許無水硫liu酸鈉。然后將濾紙條固定于軟木塞上,插入試管內,使窄端浸入溶劑中(色素點要略高于液面,濾紙條邊緣不可碰到試管壁),蓋緊軟木塞,直立于陰暗處進行層析。經過0.5─1小時后,觀察分離后色素帶的分布。最上端橙黃色為胡蘿卜素,其次黃色為葉黃素,再下面藍綠色為葉綠素a,最后的黃綠色為葉綠素b。


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