細胞免疫熒光的詳細操作步驟
點擊次數(shù):396 更新時間:2023-08-28
細胞免疫熒光的詳細操作步驟
1,取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養(yǎng)皿里,PBS洗三遍。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。
2,4%多聚甲醛固定20分鐘,PBS洗三遍。
3,0.2%Triton X 100通透10分鐘,PBS洗三遍。
4, 與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘,PBS洗三遍。
5.,一抗4度濕盒內(nèi)過夜,也可37度2小時,感覺前者效果好,PBS洗三遍。
6,二抗室溫2小時,或者37度1半小時,PBS洗三遍。
7,最好用DAPI染核,然后直接照熒光片。
8,蒸餾水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周。