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細菌的接種與分離技術(shù)方法介紹
點擊次數(shù):443 更新時間:2023-07-19

  (一)平板劃線分離法

  在被檢標本中,常混雜有多種細菌,平板劃線分離法可使這多種細菌在培養(yǎng)基表面分散生長,各自形成菌落,以便根據(jù)菌落的形態(tài)及特征,挑選單個菌落進行純培養(yǎng)。常用的平板劃線分離法有以下兩種:

  1.連續(xù)劃線分離法 此法主要用于雜菌不多的標本。用接種環(huán)取標本少許,于平板1/5處密集涂布,然后來回作曲線連續(xù)劃線接種,線與線間有一定距離,劃滿平板為止。

  2.分區(qū)劃線分離法 本法適用于雜菌量較多的標本。先將標本均勻涂布于平板表面邊緣一小區(qū)(第一區(qū))內(nèi),約占平板1/5面積,再在二、三、……區(qū)依次連續(xù)劃線。每劃完一個區(qū),均將接種環(huán)滅菌一次。每一區(qū)的劃線均接觸上一區(qū)的接種線2~3次,使菌量逐漸減少,以獲得單個菌落。

  (二)斜面接種法

  該法主要用于單個菌落的純培養(yǎng)、保存菌種或觀察細菌的某些特性。用滅菌的接種環(huán)取單個菌落或少許細菌,從培養(yǎng)基斜面底部向上劃一條直線,然后從底部向上作連續(xù)曲線劃線,一直劃到斜面頂端。

  (三)液體接種法

  多用于一些液體生化試驗管的接種。用滅菌接種環(huán)取菌少許,在試管內(nèi)壁與液面交接處的管壁上輕輕研磨,使細菌混合于培養(yǎng)液中。

  (四)穿刺接種法

  此法主要用于半固體培養(yǎng)基、明膠及雙糖管的接種。用接種針取細菌少許,從半固體培養(yǎng)基中央,平行于管壁垂直刺入,接近管底但不可接觸管底,然后接種針沿原路退出。

  (五)傾注平板法

  測定牛乳、飲水和尿液等標本細菌數(shù)時常用此方法。將標本經(jīng)適當(dāng)稀釋后,取一定量加入已滅菌的平皿內(nèi),傾入已溶化并冷卻至45℃左右的定量培養(yǎng)基,混勻,待凝固后倒置、培養(yǎng)。根據(jù)培養(yǎng)基內(nèi)的菌落數(shù)和稀釋倍數(shù),即可計算出標本的細菌數(shù)。

  (六)涂布接種法

  常用于紙片法藥物敏感性測定,也可用于被檢標本中的細菌計數(shù)。加定量的被檢菌液于瓊脂平板表面,然后用滅菌的L型玻璃棒反復(fù)涂布幾次,使被檢物均勻分布在瓊脂表面,然后貼上藥敏紙片培養(yǎng),或直接培養(yǎng)觀察結(jié)果。


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