血清主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用。由于血清來源于動物,且含有細胞培養中所需的各種營養(血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等),這奠定了血清是細胞培養實驗中最pu遍的試劑的基礎。
市面上的牛血清產品名稱雖然五花八門,但根據其不同的特性,追其根本,但大致可分為以下四種。
根據牛的取血年齡可以區分:
胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS)
指的是取自未出生,母牛剖腹心臟穿刺采血得來的血清。
國產胎牛血清(并無明確定義,但通常用此命名)
指的是出生4-6小時,且未進行哺乳(unsuckled)進食的新生牛,有時還稱作國產新生牛血清。 適用于常規細胞培養、細胞株保存和單抗研制等方面。
新生牛血清(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS,或稱小牛血清)
指的是出生14天-3個月進行取血的牛血清。適用于培養或對環境要求低的細胞。
成年牛血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS)
指的是取血時牛齡通常超過12個月的牛血清。適用于多種動物體外培養,包括:克隆細胞、單層細胞、懸浮細胞等。
以上取血牛齡的差異主要是受當地國家畜牧業的發展及法規限制影響,因為牛血多為畜牧業副產業,并未有專門為取血而養的牛。
幾種血清的比較:
提取血清體積/只牛: 成年牛血清(5-8L) > 小牛血清 (2L) > 國產胎牛血清 (1L) > 胎牛血清 (0.5L)
培養細胞的效果: 胎牛血清 > 國產胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清
價格:胎牛血清 > 國產胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清
這幾種不同牛齡血清所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組分與比例不同。常規來說,年齡越小的牛血清,細胞培養效果越好。胎牛血清培養效果好于新生牛,且因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低。故目前多數實驗人員選擇的都是胎牛血清進行細胞培養。
胎牛血清根據實驗要求的不同又進行了特殊加工工藝加工,那么在這么多種類的血清面前,要怎么選擇適合自己細胞培養的那一款呢?
根據加工工藝的不同進行區分:
去外泌體血清
去除≥99%的胎牛血清內源外泌體,并與處理前的胎牛血清具有相同的細胞生長速率和形態。適用于收集細胞分泌的外泌體時使用。
透析血清
分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進行營養成分優化和標定特定成分進行研究的實驗中。
碳吸附血清
使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質,如某些激素、細胞因子、生長因子等,去除作用對分子量大小并無區分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養研究驗證激素的作用效果。
低IgG血清
用于研究抗體、病毒和病毒反應、細胞表面抗原表位。
四環素調控胎牛血清
應用于使用敏感四環素誘導表達系統的細胞培養(Tet-on, Tet-off),以及其它對四環素敏感的實驗中。
HI (熱滅活)處理血清
血清熱滅活是通過提高血清溫度到56℃,并保持該溫度30Min完成, 可以去除血清內補體,確保細胞與抗體結合不會發生裂解。加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究中培養ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。
胚胎干細胞(ES)專用血清
是從多個批次的胎牛血清經過細胞培養及其他測試篩選出特定批號,適用于人及小鼠胚胎干細胞、成體干細胞及原代細胞長期培養。
間充質干細胞(MSC)專用血清
從多個批次的胎牛血清篩選出特定批號,經過骨髓,脂肪組織及臍帶來源的間充質干細胞的細胞活性嚴格測試,通過傳代及分化比例測試。
根據血清來源物種進行區分:
馬血清
10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應答, 常與牛血清結合或單獨作為哺乳動物細胞培養的補充培養基。
豬血清
豬血清在染色體研究中表現非常出色,可用于淋巴細胞培養, 疫苗生產(生產支原體), 中和脂質體包裹的腺相關病毒(AAV), 用于誘導大鼠肝纖維化, 作為酶聯免疫吸附試驗(ELISA)中的標準陰性參考。
兔血清
正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對照。在免疫組織化學和免疫細胞化學方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。
羊血清
用于生物醫學研究的大多數細胞系和原代培養物上,FBS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學研究。
用作魚類細胞培養的有效NBCS替代物。
可成功地代替胎牛血清在生長培養基中長期用于環孢蘑菇的體外繁殖。
雞血清
適用于單抗研制、規模化培養的疫苗生產、生物醫學研究和診斷試劑生產。
驢血清
適用于單抗研制、免疫組化、規模化培養的疫苗生產、生物醫學研究和診斷試劑生產。
小鼠血清
小鼠血清采用健康小鼠血液為原料,經無菌采集、分離、微孔過濾后而成,性狀為澄清液體,無噬菌體、低內毒素,無溶血無異物無細菌真菌支原體霉形體衣原體等,適用于試驗室或生化科研相關試驗,滿足不同科研實驗的多種需求。
我司長期供應各類動物血清:
①動物血清系列:
胎牛血清,特級新生牛血清,優級新生牛血清,標準新生牛血清,標準馬血清,特級馬血清,山羊血清,綿羊血清,兔血清,雞血清,豬血清,大牛血清,小牛血清,狗血清,驢血清,大鼠血清,小鼠血清,豚鼠血清,巴比西鼠血清。
②血漿系列:
胎牛血漿,新生牛血漿,大牛血漿,小牛血漿,兔血漿,馬血漿,山羊血漿,綿羊血漿,雞血漿,豬血漿,狗血漿,驢血漿,大鼠血漿,小鼠血漿,豚鼠血漿。
③脫纖維全血系列(玻璃瓶和Pet塑料瓶):
新生牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血,兔血,兔紅細胞(20%),綿羊紅細胞(20%),雞紅細胞(20%),兔紅細胞(4%),綿羊紅細胞4%,雞紅細胞(4%)。
④抗凝全血系列:
新生牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血
⑤裂解全血(脫纖維裂解,抗凝裂解)
脫纖維裂解血:小牛血,大牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血
抗凝裂解血:小牛血,大牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血