1.動物細(xì)胞培養(yǎng)
在所有的細(xì)胞離體培養(yǎng)中,困難的是動物細(xì)胞培養(yǎng)。下面是它所需要的特殊條件。
⑴血清:動物細(xì)胞離體培養(yǎng)常常需要血清。常用的是小牛血清。血清提供生長必需因子,如激素、微量元素、礦物質(zhì)和脂肪。有一天人們真正學(xué)會了配制和血清一樣的培養(yǎng)液,那時血清才可被取代。在這里,血清等于是動物細(xì)胞離體培養(yǎng)的天然營養(yǎng)液。
⑵支持物:大多數(shù)動物細(xì)胞有貼壁生長的習(xí)慣。離體培養(yǎng)常用玻璃,高速冷凍離心機(jī),塑料等作為支持物。
⑶氣體交換:二氧化碳和氧氣的比例要在細(xì)胞培養(yǎng)過程中不斷進(jìn)行調(diào)節(jié),不斷維持所需要的氣體條件,每一次開箱操作后的快速恢復(fù)對設(shè)備的要求可想而知有多難?由此決定了動物細(xì)胞離體培養(yǎng)設(shè)備要求高、投資大。
2.植物細(xì)胞培養(yǎng)
⑴光照:離體培養(yǎng)的植物細(xì)胞對光照條件不甚嚴(yán)格,因?yàn)榧?xì)胞生長所需要的物質(zhì)主要是靠培養(yǎng)基供給的。但光照不但與光合作用有關(guān),而且與細(xì)胞分化有關(guān),例如光周期可對性細(xì)胞分化和開花調(diào)控作用,所以以獲得植株為目的的早期植物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,光照條件特別重要。以植物細(xì)胞離體培養(yǎng)方式獲得重要物質(zhì),如藥物的過程,植物細(xì)胞大多是在反應(yīng)器中懸浮培養(yǎng)。
⑵激素:植物細(xì)胞的分裂和生長特別需要植物激素的調(diào)節(jié),促進(jìn)生長的生長素和促進(jìn)細(xì)胞分裂的分裂素是基本的激素。植物細(xì)胞的分裂,生長,分化和個體生長周期都有相應(yīng)的激素參與調(diào)節(jié)。和動物細(xì)胞相比,植物細(xì)胞離體培養(yǎng)對激素要求的原理已經(jīng)了解,其應(yīng)用技術(shù)也已相當(dāng)成熟,已經(jīng)有一套廣泛作為商品使用的培養(yǎng)液。同時解決了植物細(xì)胞對水、營養(yǎng)物、激素、滲透壓、酸堿度、微量元素等的需求。
3.微生物細(xì)胞培養(yǎng)
微生物多為單細(xì)胞生物,野生生存條件比較簡單。所以微生物人工培養(yǎng)的條件比動植物細(xì)胞簡單得多。其中厭氧微生物培養(yǎng)比好氧微生物復(fù)雜,因?yàn)閲?yán)格厭氧需要維持二氧化碳等非氧的惰性氣體濃度,而好氧微生物則只需要通過不斷攪拌提供無菌氧氣。微生物對培養(yǎng)條件要求不如動植物細(xì)胞那樣苛刻,玉米漿、蛋白胨、麥芽汁、酵母膏等成為良好的微生物天然培養(yǎng)基。對于一些特殊微生物的營養(yǎng)條件要求,可以在這些天然培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上額外添加。