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細菌濃度的簡單確定法:麥氏比濁法介紹
點擊次數(shù):506 更新時間:2023-06-12

麥氏比濁管是McFarland發(fā)明的一種用于微生物比濁的不同濁度的標準濁度管。具體的配制方法是根據(jù)硫酸和氯化鋇的比例來定的,有表可查,這樣不同比例生成的硫suan鋇沉淀的濃度不同,且都有定值。

麥氏比濁管的配比如下:

管 號 (McFarland)

0.5

1

2

3

4

5

0.25%BaCl 2 ( ml )

0.2

0.4

0.8

1.2

1.6

2.0

1%H 2 SO 4 (ml)

9.8

9.6

9.2

8.8

8.4

8.0

細菌的近似濃度 ( × 10 8 /ml)

1

3

6

9

12

15


操作方法:

1、輕搖標準試管。

2、無菌操作將被測定的肉湯培養(yǎng)物加到與標準管相同直徑(大?。┑臒o菌試管中。

3、以無菌操作向被測定試管加入無菌生理鹽水(NaCl),直到濃度與所要求的標準管的濃度相同。

使用技巧:

1、直接用眼睛看(需要經驗,誤差較大)。

2、找張白紙,打上平行直線,然后看(如圖示,利用光在不同濃度液體折射不同)。

注意事項:

1、如果測定的肉湯培養(yǎng)物不澄清,由培養(yǎng)物的值減去未接種培養(yǎng)基的值來校正細菌濃度。4號管(肉湯培養(yǎng)物)-1號管(孵育過的未接種的肉湯管)=3號管(校正讀數(shù))。

2、如果肉湯顏色很深,把未接種試管放在標準管的后面讀數(shù)即可。

編者注:

1、測定好的細菌,最好做一下梯度稀釋涂布計數(shù)。

2、此濃度是對應的大腸桿菌的濃度,如果是其他細菌,會有一定的差別,但編者做過的幾個菌差別都在一個數(shù)量級之內,適合于普通實驗。

3、此種方法測定的準確性不是很高,如果是對細菌數(shù)量要求較精確的,請用紫外分光光度計。


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