一、培養箱環境污染
很多實驗室培養霉菌采用的是專用的霉菌培養箱,所以培養箱空間里會有大量的霉菌孢子。而平皿的蓋和底是有一定縫隙的,尤其是玻璃平皿縫隙還是比較大的,正置培養中,孢子會向上飛揚通過縫隙落到平板的培養基上,導致污染。細心地實驗猿可能發現,污染的菌落大部分都是在平皿邊緣生長的。用一次性塑料平皿來培養,污染的概率就會小很多,因為一次性塑料平皿的蓋和底之間的縫隙相比之下是比較小的。因此培養箱環境中的孢子可能會是主要污染源。
這樣一來,解決的方法就應該是對培養箱進行殺菌。可以考慮用紫外線殺一下菌,同時輔助消毒劑擦拭的方法,常用消毒劑比如75%酒精和新潔爾滅等,應該注意的是,這樣的殺菌操作也是需要經常進行的,因為霉菌的孢子是十分難清除的,而每次培養可能又會引進新的污染源,可以考慮每周進行兩次,保證培養環境無污染源。
二、平皿冷凝水污染
正置培養過程中,若是平皿的上蓋有泠凝水,在培養過程中冷凝水滴落到培養基上,也極容易造成菌落蔓延,平皿污染。因此在培養之前,一定要保證平皿干燥,可以把平皿放在37℃的環境里烘干,烘干之后再進行培養,就會避免這個原因造成的污染。
三、操作環境和培養基的污染
因為無菌室里可能也會因為滅菌效果不理想造成污染。小編之前工作的實驗室,操作臺使用紫外線滅菌,經常就會滅菌不徹di有孢子污染,尤其是在進行過霉菌的相關檢測之后。所以在進行過霉菌檢測之后,適當的增長滅菌時間,可能會達到比較理想的效果。另外,為了徹di解決無菌室空間孢子污染的問題,可以購買安裝臭氧發生器,通過紫外線+臭氧的雙重消毒模式,效果就十分理想了。
大家如果還是想驗證一下究竟是什么原因造成的污染,這里提供一個簡單的驗證試驗:在正常檢測的環境中倒一組空白平皿,將這些平皿分為AB兩組,其中A組用有充足氧氣的自封袋將平皿封好,B組不封,均放置在培養箱中正置培養。若是A組B組均有霉菌生長,則需要考慮培養基污染或者操作環境的污染;若是A組不生長霉菌而B組生長,則需要考慮是培養箱內的環境污染。通過這個小試驗,可以基本上確定污染源,然后針對污染源進行相應的處理。