熒光定量PCR實驗中的空白對照解析
點擊次數:351 更新時間:2023-04-11
熒光定量PCR實驗中的空白對照
無模板空白對照
NTC是指不含有模板(陽性模板或者陰性模板)的對照。目前的試劑盒的NC一般都是水或陰性緩沖液,所以NC等同于NTC。其實兩者有不同的作用。
儀器空白對照
NTC是含有引物探針和反應液主要監控引物探針,反應體系有沒有被污染。這里的儀器空白對照我通常使用的是空反應管來監控儀器有無非特異性的熒光信號。
熒光染料對照
最常使用的是ROX染料,由于熒光定量PCR的熒光信號在每個樣品孔會有微小的差異所以使用特定的ROX熒光染料,系統可以根據ROX熒光染料的信號值來校準每孔的熒光信號。