遠慕分享:動植物細胞大量培養的培養方法
點擊次數:269 更新時間:2023-04-04
大量培養動物細胞的方法可分為兩種:
①懸浮培養,淋巴細胞和腫瘤細胞等能在液體培養基中懸浮生長。懸浮培養系統,工業放大容易,成本低,不易受污染,可在帶螺旋槳或平槳攪拌的通用發酵罐中進行。
②大多數動物細胞需要附著在一定的固定表面上才能增殖,因此稱單層培養。單層培養的突出問題是提供細胞生長所需的表面積。迄今為止應用最guang泛的是滾瓶法,滾瓶是平放的玻璃瓶,內盛培養基,細胞在其內壁上附著生長,隨著瓶子滾動細胞間歇地接觸空氣和培養基。此外,最you效地提供比表面積(表面積/培養基體積)的是微珠法。微珠的直徑為40~250μm,當1mg微珠懸浮在1ml培養基上時,能提供的表面積大于5cm2。另一種能提供較大的比表面積的載體為中空纖維,一般結構是把纖維管束裝置在圓筒內,培養基一般在管間流動,細胞在管內外壁表面上生長,氣體可通過中空纖維管擴散至培養基中。
如何判斷一種細胞的生存狀態好壞
貼壁細胞在生長狀態良好時,細胞均質而透明,細胞內顆粒少,看不到空泡,細胞邊緣清楚,培養基內看不到懸浮的細胞和碎片,培養液清澈透明。