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常規培養基的配制流程介紹
點擊次數:223 更新時間:2023-03-23

1、計算稱量

根據待檢樣品屬性計算出所需的不同培養基的體積,根據說明書進行準確稱量;電子天平需開機預熱30min后使用,稱量過程中手要穩,避免將培養基灑落在天平稱量盤中,若灑落,應立即停止稱量,使用潔凈布擦干粉末,重新調“0"后稱量。

2、溶化

對于可溶性淀粉,先用少量冷水調成糊狀,再放入沸水中;不易溶解的培養基,先加入少量純化水振搖溶解后,二次加水配制;需分裝的培養基,需wan全溶解,含瓊脂的培養基需加熱融化,wan全溶解后,分裝至不同容器中進行滅菌。

3、分裝

如果要制作斜面培養基,須將培養基分裝于試管中。如果要制作平板培養基或液體、半固體培養基,則須將培養基分裝于錐形瓶內。分裝時,一手捏松彈簧夾,使培養基流出,另一只手握住幾支試管或錐形瓶,依次接取培養基。分裝時,注意不要使培養基粘附管口或瓶口,以免引起雜菌污染。裝入試管的培養基量,視試管和錐形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培養基時,每只15×150毫米的試管,約裝3~4毫升(1/4~1/3試管高度),如制作深層培養基,每只20×220毫米的試管約裝12~15毫升。

4、加塞

分裝完畢后,需要用硅膠塞堵住管口或瓶口。主要目的是過濾空氣,避免污染。不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。塞入管口或瓶口中的硅膠塞,應緊貼內壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿褶皺侵入,塞好后,以手提塞,管、瓶不下落為合適;硅膠塞的2/3應在管內,上端露出少許便于拔取。

5、包扎

塞好塞的試管和錐形瓶應蓋上牛皮紙用繩扎緊,同時貼上標簽,注明培養基的名稱、組別、配制日期后,準備滅菌。

6、滅菌

根據培養基說明書規定的滅菌參數進行滅菌。滅菌后,如制作斜面培養基和平板培養基,須趁培養基未凝固時進行。

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