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細(xì)胞因子中全血的標(biāo)本處理方法
點(diǎn)擊次數(shù):323 更新時(shí)間:2023-02-15

細(xì)胞因子中全血的標(biāo)本處理方法分析:我們針對(duì)全血:使用肝su鈉抗凝的真空采血管采血,不易采用肝素鋰、EDTA和ACD抗凝劑,血樣在8小時(shí)內(nèi)分析,超過(guò)8小時(shí)會(huì)導(dǎo)致活性的損失,一般細(xì)胞因子陽(yáng)性細(xì)胞會(huì)減少5%。如不能在8小時(shí)之內(nèi)檢測(cè),應(yīng)將真空采血管水平室溫放置。

自身血漿中外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs):使用肝su鈉抗凝的采血后,分離PBMCs,24小時(shí)內(nèi)分析。

組織培養(yǎng)基中的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs):用Ficoll分離PBMCs,將細(xì)胞重懸于含10%熱滅活胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培養(yǎng)基中,調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度為2×106細(xì)胞/ml。調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度2×106細(xì)胞/mL于新鮮培養(yǎng)基中。

冰凍全血與PBMCs:使用1×紅細(xì)胞裂解液處理活化的外周血或者PBMCs,用PBS漂洗,并用含1%的BSA及10%的DMSO的PBS重懸,-70℃凍存。溶化后細(xì)胞置于染色管中,加上2~3mL的洗液,離心5分鐘后,用破膜劑對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破膜和染色。

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