在生化實驗中,生物緩沖劑會被經常用到,但種類繁多,很多采購者不知道如何選擇,可能當時選擇的緩沖劑從表面上看非常符合,但在實際使用時卻存有一定的差異性,這就直接導致實驗無法進行下去,可能也浪費了大量的金錢和時間。這時能采購到適合且性價比高的緩沖劑尤為重要,那么不同的緩沖劑,它們之間的優勢區別到底是什么呢?下面,遠慕生物就Tris-HCL和HEPES緩沖液來詳細說一下。
Tris-HCl緩沖液
其實,Tris緩沖液在生化實驗檢測分析中一直使用得很普遍,它是一種弱堿性緩沖劑,有效PH值在中性,所以Tris-HCl緩沖液的pH在7.5~8.5之間。
Tris-HCl緩沖液的優勢
性能穩定,相容性好,和鈣離子、鎂離子在一起不會產生沉淀現象,但是磷酸鹽與鈣、鎂離子會產生沉淀。并且由于Tris-HCl緩沖液中的離子電性強度弱,緩沖液離子強度的高低決定著酶類物質的失活,所以這對于酶類測定很重要。
HEPES緩沖液
HEPES與Tris-HCl緩沖液的不同之處就是它并非是堿性或酸性緩沖液,而是非離子兩性緩沖液,其有效PH范圍在7.2-7.4之間,具有較好的緩沖能力,常用于診斷試劑盒中,以及DNA/RNA的提取試劑盒里。
HEPES緩沖液的優勢
通常它在水中的穩定性能佳,pKa值在6-8之間,溶解性能好,不會產生干擾性,在可見光和紫外光上吸收極低,耐于化學和酶解作用,且不與金屬離子發生沉淀現象,其離子濃度、溶液組成和溫度對解離的影響小。
HEPES和Tris-HCl為粉末狀,在配置成溶液后,建議是即配即用,效果更佳,平時保存放于干燥室內環境中,不長期暴露在陽光和空氣中即可。