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單核細胞增生李斯特氏菌的培養特性與生化反應!
點擊次數:307 更新時間:2022-11-30

單核細胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)簡稱單增李斯特菌,革蘭氏陽性小桿菌,大小為(0.4-0.5)μm×(0.5-2)μm,直或稍彎,多數菌體一端較大,似棒狀,常呈V字型排列,有的呈絲狀,偶爾可見雙球狀。在22℃-25℃環境可形成4根鞭毛。本菌對理化因素抵抗力較強。在士壤、糞便、青貯飼料和干草內能長期存活:對堿和鹽抵抗力強,對青/霉素、氨芐青/霉素、四環素、磺胺等均敏感。本菌營養要求不高,兼性厭氧。菌落初期極小,水滴樣,經37℃數天培養后,直徑可達2mm,初期菌落光滑、透明,后變灰暗。血平板上的菌落有β-型溶血環本菌耐堿不耐酸,在4℃-45℃均能生長,最適生長溫度30℃-37℃。

培養基.png

一、菌株來源

李斯特氏菌是1926年英國南非裔科學家穆里在病死的兔子體內首/次發現的。為紀念近代消毒手術之父、英國生理學家約瑟夫·李斯特(1827-1912),1940年,在第三屆國際微生物學大會上將其命名為李斯特氏菌。

二、菌株種類

國/際上公/認的李斯特菌共有以下七個菌株:單核細胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、綿羊李斯特菌(Listeria iuanuii)、英諾克李斯特菌(Listeria innocua)、威爾斯李斯特菌(Listeria welshimeri)、西爾李斯特菌(Listeria seeligeri)、格雷李斯特菌(Listeria grayi)、默里李斯特菌(Listeria murrayi)。其中,單核細胞增生李斯特氏菌是唯1能夠引起人類疾病的,它是一種人畜共患病的病原菌,中毒嚴重的可引起血液和腦組織感染。單核細胞增生李斯特氏菌簡稱單增李斯特氏菌,為革蘭陽性菌,屬厚壁菌門。

三、細菌分型

根據菌體(O)抗原和鞭毛(H)抗原,將單增李斯特氏菌分成13個血清型,分別是1/2a、1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、4b、4ab、4c、4d、4e 和“7"13 個血清型。致病菌株的血清型一般為1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、1/2a和4b,后兩型尤多。該菌與多種革蘭陽性菌有共同抗原,故血清學診斷無意義。

本菌的抗原結構與毒力無關,且本菌與葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌等多數革蘭氏陽性菌和大腸桿菌有共同抗原,故血清學診斷無意義。

四、形態與染色

該菌為革蘭氏陽性短桿菌,大小約為0.5μmх1.0-2.0μm,直或稍彎,兩端鈍圓,常呈V字型排列,偶有球狀、雙球狀,兼性厭氧、無芽胞,一般不形成莢膜,但在營養豐富的環境中可形成莢膜,在陳舊培養中的菌體可呈絲狀及革蘭氏陰性,該菌有4根周毛和1根端毛,但周毛易脫落。

幼齡培養物為革蘭氏陽性,陳舊培養物可轉為革蘭氏陰性,呈兩極著色,易誤認為雙球菌。

五、培養特性

該菌營養要求不高,在20-25℃培養有動力,穿刺培養2-5天可見倒立傘狀生長,肉湯培養物在顯微鏡下可見翻跟斗運動。該菌的生長范圍為2-42℃(也有報道在0℃能緩慢生長),最適培養溫度為35--37℃,在pH中性至弱堿性(pH9.6)、氧分壓略低、二氧化碳張力略高的條件下該菌生長良好,在pH3.8-4.4能緩慢生長,在6.5% NaCl 肉湯中生長良好。在固體培養基上,菌落初始很小,透明,邊緣整齊,呈露滴狀,但隨著菌落的增大,變得不透明。在5-7%的血平板上,菌落通常也不大,灰白色,刺種血平板培養后可產生窄小的β-溶血環。在0.6%酵母浸膏胰酪大豆瓊脂(TSAYE)和改良Mc Bride(MMA)瓊脂上,用45角入射光照射菌落,通過解剖鏡垂直觀察,菌落呈蘭色、灰色或蘭灰色。

六、生化反應

該菌觸酶陽性,氧化酶陰性,能發酵多種糖類,產酸不產氣,如發酵葡萄糖、乳糖、水楊素、麥芽糖、鼠李糖、七葉苷、蔗糖(遲發酵)、山梨/醇、海藻糖、果糖,不發酵木糖、甘露/醇、肌醇、阿拉伯糖、側金盞花醇、棉子糖、衛矛醇和纖維二糖,不利用枸櫞酸鹽,40%膽汁不溶解,吲哚、硫化氫、尿素、明膠液化、硝酸鹽還原、賴氨酸、鳥氨/酸均陰性,VP、甲基紅試驗和精氨/酸水解陽性。

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