真菌毒素(mycotoxins) 是由真菌寄生于谷物或水果等農作物上,在適宜條件下產生的具有生物活性的一類物質。真菌和真菌毒素的廣泛存在,嚴重影響農作物的產量,降低農產品和飼料品質,造成巨大經濟損失。據悉,全/世界每年由于霉變污染真菌毒素引起的農產品和工業原料的損失達數百億美元。我國谷物霉變主要發生在北緯31°線即長江以南地區,每年使糧食減產3~7%。據調查,除糧食、飼料以外,在油料作物、種子、水果、干果、蔬菜、調味品、煙草、麻類、乳和乳制品、魚蝦、肉類、發酵產品等都發現了不同程度的真菌毒素污染。所以在某種程度上比其他毒素如細菌毒素更危險。
糧食及飼料中真菌毒素的檢測方法可以分為三類:
一類是生物學檢測法,包括種子發芽試驗、嘔吐試驗等,很不利于快速檢測,已很少采用;
一類是理化檢測法,薄層色譜法(TLC)和高效液相色譜法(HPLC)。TLC雖然簡便,但靈敏度差;HPLC雖然靈敏度高,但樣品處理煩瑣,操作復雜,儀器昂貴,標準品耗用大。
另一類是免疫化學檢測法,如ELISA方法和膠體金免疫層析方法。ELISA法特別適宜大批樣品集中檢測,膠體金免疫層析方法適合現場單個或少數樣品即時檢測。
真菌毒素膠體金檢測試紙基于抗原抗體的免疫原理,利用納米膠體金層析技術,在真菌毒素的現場檢測時具有以下優勢:
1) 單個樣品即可檢測,無需儀器設備,特別適合現場檢測;
2) 靈敏度高: 免疫層析法可檢出量可達ng級,ELISA法最/低檢出量可達pg級,并可定量測定。
3) 特異性強:抗體抗原的免疫反應特異性很強,結構類似物、熒光物質、有色物質對檢測的干擾很小,可檢測樣本本身顏色深的產品,如玉米。
4) 操作簡便,反應迅速:由于特異性強,簡化了樣品的預處理和提取純化過程,同時操作步驟也非常簡便,5~10分鐘即可判讀結果。
5) 結果判讀簡單,通過判讀膠體金出線情況即可肉眼識別結果,重復性高,不易產生人為誤差。
6) 穩定性好:干法試劑,穩定性好,常溫下可儲存18個月,方便儲存運輸;
7) 安全性高,污染少,成本低廉,不需要昂貴的測定儀器,所用試劑也相對較少,特別是因為靈敏度高,毒素標準品的濃度可以很低,減少了對檢測人員和環境的潛在危害和污染。
以黃曲/霉毒素B1快速檢測為例,目前快檢方法存在三種方法:
1、酶聯免疫試劑盒Elisa;
2、膠體金快捷型---直接法;
3、膠體金精準型--萃取復溶法。
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黃曲/霉毒素B1快速檢測膠體金試紙卡(快捷型---直接法)
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