在細胞培養過程中,預防污染是頭等大事。在細胞生長狀態良好的情況下,細胞培養只是實驗過程中最基本操作之一。但當細胞一旦遭受污染,所有實驗研究將被暫停。污染的發生有時甚至會影響整個實驗室的實驗進程。
為了避免污染,蕞常用的方法就是在細胞培養基中添加抗生素。蕞常用的是青霉素、鏈霉素聯合抑制細菌,即所謂的“雙抗",主要作用于細菌的細胞壁與核糖體。由于真核細胞沒有細胞壁以及核糖體與原核細胞不同,抗生素一般對真核細胞培養無害。然而,研究數據表明,事實并不是這樣。
早在十幾年前,就有很多報導指出β-內酰胺類抗生素及氨基糖甙類抗生素,對真核細胞培養有抑制增殖作用。并且這種抑制增殖作用在原代細胞和干細胞等難養細胞上尤其明顯。2017年,加州大學Nadav Ahituv博士在Scientific Reports上發表文章,呼吁在細胞培養過程中減少抗生素的使用。他們發現抗生素(“雙抗":青霉素和鏈霉素)的使用影響人體肝細胞中基因表達與基因調控。其中有209個基因的表達發生了改變,特別是與藥物和應激反應相關的基因。超過9,500個基因調控元件發生了變化,并且很多調節元件位于參與細胞分化,核酸酶活性和tRNA修飾的基因附近。雖然這些基因的數量在龐大的細胞基因庫中不值一提,但這絕對不是一個應該被忽略的事件。
雖然抗生素對真核細胞生長的影響機制至今尚未明確,但是為了我們的細胞生長的更好,科研研究更加準確,實驗數據更加穩定,在實驗過程中盡量不要使用抗生素。
這也是為什么很多嚴謹的細胞實驗選擇進口血清而非國產的。在國外,抗生素的使用控制嚴格,每頭奶牛的產品包含血清都可以溯源。而國內,抗生素的亂用已成了普遍現象,血清中殘留很高,這種現象嚴重影響了國產血清的口碑。而且,現在國內血清市場亂象頻繁發生,市面上常有不良商家通過勾兌貼標等行為冒充一些zhi名的進口品牌,非常難以辨識。為了防止在包裝、運輸等過程中污染,常常添加大量的抗生素抑制細菌滋生。這對我們的細胞以及實驗都會產生一定的影響。因此,在選擇血清時,一定要看清品牌,選擇一家有資質的血清銷售公司。