胎牛血清是當(dāng)前細(xì)胞培養(yǎng)用量最大的天然培養(yǎng)基,因其不可替代性胎牛血清的質(zhì)量好壞關(guān)系到培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的成敗與否。那么胎牛血清地位如此重要如何才能保障品質(zhì)呢?
1. 內(nèi)毒素
內(nèi)毒素含量越低的血清,胎牛血清級(jí)別就越高:
內(nèi)毒素≤10EU/ml時(shí),此血清為特級(jí)胎牛血清;
10EU/ml<內(nèi)毒素≤ 25EU/ml時(shí),此血清為優(yōu)級(jí)胎牛血清;
內(nèi)毒素≥ 25EU/ml時(shí),此血清為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清;
應(yīng)選取內(nèi)毒素含量低的胎牛血清,使培養(yǎng)的細(xì)胞更健康。如果選取內(nèi)毒素較高的血清,細(xì)胞一直泡在“毒液”里,短期內(nèi)細(xì)胞看不出太明顯的變化,但長(zhǎng)期的話細(xì)胞會(huì)衰老得較快,從而對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成嚴(yán)重影響。
2. 微生物
微生物包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。
嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝可以對(duì)細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100-%控制。
同時(shí)最后3次0.1um過濾可以*祛除支原體(支原體直徑0.2~0.3um)。
通過病毒的檢測(cè),可以嚴(yán)格控制牛腹瀉、牛細(xì)小、藍(lán)舌病等病毒。
通過非瘋牛病疫區(qū)采血生產(chǎn)還可避免朊病毒。
3. 采血時(shí)間
胎牛血清是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(zhǎng)分化階段,血中含有豐富的生長(zhǎng)發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng),一旦胚胎發(fā)育*這些因子自動(dòng)消失。因此8個(gè)月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。