實驗方法原理:
干粉型培養基是用球磨機或噴霧法將各種培養液成分混合后制成,具有性質穩定、便于貯存和運輸、使用方法簡便等優點。具有維持細胞生存和代謝需要的效果,與傳統方式制備的合成培養基一樣好。
干粉培養基因顆粒極細,很容易*溶解于水,配制培養液方法極易掌握,只要按照說明書將規定重量的干粉溶解在一定量的水中即可;或按比例配制,經過消毒滅菌后即使用。
實驗材料: 干粉
試劑、試劑盒:蒸餾水 NaHCO3 HCl NaOH
儀器、耗材:濾膜
實驗步驟:
用干粉制備培養液的過程如下
1. 制備出去離子水(玻璃三蒸餾水);
2. 加溫水至15—30 ℃;
3. 把干粉加入水中,攪拌令之溶解;
4. 加NaHCO3;
5. 加水至終量;
6. 必要時用1N HCl 或1N NaOH 調節pH;因濾過的pH 可能受影響;
7. 用0.22 μm 或小于此微孔濾膜濾過消毒。
注意事項:
1. 不同廠家生產的同種產品其成分比例可能不全相同,配制方法也不同。
2. 有的培養基需加熱或通氣來幫助溶解,此外還應注意有的培養基成分不*,要求另外加入補充成分。
3. 如谷氨酰胺就是時常再單獨加入的成分。另外一般都不含NaHCO3 成分,也需配制時自行加入。
4. 但總的原則是配制過程中要使每一種成分都必須充分溶解和避免出現沉淀。
5. 所以在配制培養液時,要按照各種成分的性質、分成若干組分個別溶解,后按比例和一定順序混合。
6. 掌握1—2 種粉劑的配法即可,其它大同小異。