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做實驗 | 這個Masson 染色技巧,相當(dāng)了得 skr~
點擊次數(shù):1779 更新時間:2018-10-11

      Masson三色染色是結(jié)締組織染色中經(jīng)典的一種方法,又稱馬松染色,是顯示組織中纖維的主要方法之一,是膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法。

  Masson染色

該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān),分子的大小由分子量來體現(xiàn),小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或苯胺藍的分子量都很大,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色或藍色,主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

 病理診斷意義

(1)器官硬化性疾病的觀察:如肝硬變、心肌瘢痕的觀察,膠原染色更易于觀察診斷。

(2)瘢痕與淀粉樣物質(zhì)鑒別:前者膠原纖維染色為陽性,后者為陰性。

(3)骨纖維異常增殖病與骨纖維化的鑒別:利用膠原纖維染色可較易觀察前者膠原纖維紊亂,縱橫交錯,后者較規(guī)則。

樣本要求:組織片充分固定和脫蠟。

 實驗步驟

1.石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ10min-無水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。

2.蘇木素染細胞核:masson染色試劑盒內(nèi)Weigert氏鐵蘇木素染5min,自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水沖洗,流水沖洗數(shù)分鐘返藍。

3.麗春紅染色:masson染色試劑盒內(nèi)麗春紅酸性品紅液染5-10 min,蒸餾水快速漂洗。

4.磷鉬酸處理:masson染色試劑盒內(nèi)磷鉬酸水溶液處理約3-5 min。

5.苯胺藍染色:不用水洗,直接用masson染色試劑盒內(nèi)苯胺藍液復(fù)染5min。

6.分化:1%冰醋酸處理1min。

7.脫水封片:將切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-無水乙醇Ⅰ5min -無水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脫水透明,將切片從二甲苯拿出來稍晾干,中性樹膠封片。

8.顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。

 

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