上海遠慕技術詳解:免疫血清c化抗體操作
點擊次數:1104 更新時間:2017-01-03
上海遠慕技術詳解:免疫血qin純化抗體操作
免疫血清(immuneserum)亦稱抗血清。含有抗體的血清制劑。種類很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。關于免疫血qin純化抗體的詳細操作步驟我公司專業技術提供專業的技術指導。如下:
1.剪取一小條0.45μm的硝酸纖維膜,置于1.5mleppendorf管中,浸沒于1ml1mg/ml的抗原溶液中,5min。
2.取出膜,置于濾紙上干燥。
3.將膜放置于裝有1mlBufferA的eppendorf管,輕輕震蕩混勻30min。
4.移去BufferA,用新鮮的BufferA洗一次,將膜浸沒于0.8-1ml相應的抗血清中,1-2h,于混勻器上輕輕震蕩混勻。
5.移去血清,用PBS洗膜,4次,每次5min。
6.洗脫抗體
新配置100mM甘氨酸(pH2.5)抗體洗脫液,將膜置于洗液中,手輕搖混勻2min,迅速將洗液轉移至裝有100μl1MTris(pH8.0)中和,使抗體復性。第1次洗脫用400μl抗體洗脫液,第2,3次用200μl。
7.往洗脫下來的液體中加入100μlBufferA以穩定抗體,并分裝成30μl每管,于-20℃保存。
注:所有步驟均在室溫完成。