ELISA試劑盒需把握的關(guān)鍵有哪些?
點擊次數(shù):241 更新時間:2023-09-19
ELISA實驗的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記,其中,結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。進行檢測時,樣品中的受檢物質(zhì)(抗原或抗體)與固定的抗體或抗原結(jié)合。通過洗板除去非結(jié)合物,再加入酶標記的抗原或抗體,此時,能固定下來的酶量與樣品中被檢物質(zhì)的量相關(guān)。通過加入與酶反應(yīng)的底物后顯色,根據(jù)顏色的深淺可以判斷樣品中物質(zhì)的含量,進行定性或定量的分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的靈敏度。
那么ELISA試劑盒需把握的關(guān)鍵有哪些?
1.在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以避免蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致呈現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
2.小心汲取試劑并嚴格遵守給定的孵育時刻和溫度。請注意在汲取標本/規(guī)范品,酶結(jié)合物或底物時,di一個孔與一個孔加樣之間的時刻距離假如太大,將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時刻,然后明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。
3.試劑盒保存:部分試劑保存于-20℃,部分試劑保存于2-8℃,具體以標簽上的標示為準。
4.濃洗滌液會有鹽分出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
5.剛敞開的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對試驗結(jié)果造成任何影響。
6.一切的樣品都應(yīng)管理好,依照規(guī)則的程序處理樣品和檢測設(shè)備。