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培養(yǎng)基ph調(diào)整的注意事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):479 更新時(shí)間:2023-05-25

測(cè)定培養(yǎng)基pH的最準(zhǔn)確的方法是使用pH計(jì),使用前必須用已知pH的(通常pH為4-7)標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液進(jìn)行校準(zhǔn)。將pH計(jì)的電極用蒸餾水沖洗后浸入到燒杯的培養(yǎng)基中,就可以從pH計(jì)的刻度讀出培養(yǎng)基的pH。每個(gè)生產(chǎn)廠商對(duì)每種不同pH計(jì)都提供有詳細(xì)的操作說(shuō)明。接下來(lái)遠(yuǎn)慕為大家詳細(xì)解答。

M-綠色酵母菌-霉菌培養(yǎng).jpg



配制培養(yǎng)基時(shí),使用帶機(jī)械攪拌的pH計(jì)可以很容易地調(diào)整pH。

培養(yǎng)基位在能夠不停攪拌的容器(如大燒杯)中配制,使用磁力攪拌器,磁力攪拌器帶有聚乙烯或聚四氟乙烯包裝的磁棒。含瓊脂的培養(yǎng)基需在融化后調(diào)整其pH,用可加熱的磁力攪拌器很容易辦到。調(diào)節(jié)pH時(shí)用已知pH的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液溶液先對(duì)pH計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。然后將復(fù)合電極和電阻溫度計(jì)(如果有)置于培養(yǎng)基,從燒杯遠(yuǎn)離電極的一端緩慢加人適量的鹽酸和氫氧化鈉,保到培養(yǎng)基達(dá)到并保持所需的pH。

pH計(jì)的溫度補(bǔ)償應(yīng)考慮到溫度對(duì)電極系統(tǒng)的影響:在一些稀釋液和培養(yǎng)基中,pH隨溫度的變化而有相當(dāng)大的變化。對(duì)于液體培養(yǎng)基和稀釋液而言,通常既可以在25℃下,也可以在其使用時(shí)的溫度下調(diào)整和測(cè)定。

瓊脂培養(yǎng)基必須在溶解后進(jìn)行pH的調(diào)整,溶解的溫度在45℃以上。因此,固體培養(yǎng)基應(yīng)在其使用溫度確定pH。這時(shí)應(yīng)使用平頭的復(fù)合電極,同時(shí)用手動(dòng)校準(zhǔn)pH計(jì)的溫度補(bǔ)償。在制備培養(yǎng)基時(shí),若測(cè)定出培養(yǎng)基在熔化狀態(tài)和凝固狀態(tài)的pH有所不同時(shí),說(shuō)明在調(diào)整pH產(chǎn)生誤差。

同樣,制備的培養(yǎng)基在加熱滅菌處理(如高壓滅菌>時(shí),也可能會(huì)產(chǎn)生pH的變化。對(duì)于脫水培養(yǎng)基,生產(chǎn)廠商己考慮到這一點(diǎn),通常不謠要再調(diào)整其pH。但應(yīng)認(rèn)真核對(duì)待用培養(yǎng)基的pH。如果脫水的瓊脂培養(yǎng)基在再次溶解或制備的過(guò)程中必須調(diào)整pH,那么在滅菌操作步驟之后用過(guò)濾滅菌的鹽酸和氫氧化鈉溶液進(jìn)行調(diào)整,以避免造成因再次滅菌而形成的培養(yǎng)基的過(guò)度加熱。當(dāng)用不同的原枓或藥品制備培養(yǎng)基時(shí),必須在高壓滅菌后檢測(cè)培養(yǎng)基的pH。此外,如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基的在每次高壓滅菌后都發(fā)生相同變化,可在配制培養(yǎng)基時(shí)對(duì)pH進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。但仍需測(cè)定培養(yǎng)基滅菌后的最終pH。

測(cè)定培養(yǎng)基pH的最準(zhǔn)確的方法是使用pH計(jì),使用前必須用已知pH的(通常pH為4-7)標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液進(jìn)行校準(zhǔn)。將pH計(jì)的電極用蒸餾水沖洗后浸入到燒杯的培養(yǎng)基中,就可以從pH計(jì)的刻度讀出培養(yǎng)基的pH。每個(gè)生產(chǎn)廠商對(duì)每種不同pH計(jì)都提供有詳細(xì)的操作說(shuō)明。

配制培養(yǎng)基時(shí),使用帶機(jī)械攪拌的pH計(jì)可以很容易地調(diào)整pH。


培養(yǎng)基位在能夠不停攪拌的容器(如大燒杯)中配制,使用磁力攪拌器,磁力攪拌器帶有聚乙烯或聚四氟乙烯包裝的磁棒。含瓊脂的培養(yǎng)基需在融化后調(diào)整其pH,用可加熱的磁力攪拌器很容易辦到。調(diào)節(jié)pH時(shí)用已知pH的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液溶液先對(duì)pH計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。然后將復(fù)合電極和電阻溫度計(jì)(如果有)置于培養(yǎng)基,從燒杯遠(yuǎn)離電極的一端緩慢加人適量的鹽酸和氫氧化鈉,保到培養(yǎng)基達(dá)到并保持所需的pH。

pH計(jì)的溫度補(bǔ)償應(yīng)考慮到溫度對(duì)電極系統(tǒng)的影響:在一些稀釋液和培養(yǎng)基中,pH隨溫度的變化而有相當(dāng)大的變化。對(duì)于液體培養(yǎng)基和稀釋液而言,通常既可以在25℃下,也可以在其使用時(shí)的溫度下調(diào)整和測(cè)定。

瓊脂培養(yǎng)基必須在溶解后進(jìn)行pH的調(diào)整,溶解的溫度在45℃以上。因此,固體培養(yǎng)基應(yīng)在其使用溫度確定pH。這時(shí)應(yīng)使用平頭的復(fù)合電極,同時(shí)用手動(dòng)校準(zhǔn)pH計(jì)的溫度補(bǔ)償。在制備培養(yǎng)基時(shí),若測(cè)定出培養(yǎng)基在熔化狀態(tài)和凝固狀態(tài)的pH有所不同時(shí),說(shuō)明在調(diào)整pH產(chǎn)生誤差。

同樣,制備的培養(yǎng)基在加熱滅菌處理(如高壓滅菌>時(shí),也可能會(huì)產(chǎn)生pH的變化。對(duì)于脫水培養(yǎng)基,生產(chǎn)廠商己考慮到這一點(diǎn),通常不謠要再調(diào)整其pH。但應(yīng)認(rèn)真核對(duì)待用培養(yǎng)基的pH。如果脫水的瓊脂培養(yǎng)基在再次溶解或制備的過(guò)程中必須調(diào)整pH,那么在滅菌操作步驟之后用過(guò)濾滅菌的鹽酸和氫氧化鈉溶液進(jìn)行調(diào)整,以避免造成因再次滅菌而形成的培養(yǎng)基的過(guò)度加熱。當(dāng)用不同的原枓或藥品制備培養(yǎng)基時(shí),必須在高壓滅菌后檢測(cè)培養(yǎng)基的pH。此外,如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基的在每次高壓滅菌后都發(fā)生相同變化,可在配制培養(yǎng)基時(shí)對(duì)pH進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。但仍需測(cè)定培養(yǎng)基滅菌后的最終pH。

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