1、菌種要求
菌種試驗用菌株的傳代次數不得超過5代(從菌種保藏中心獲得的干燥菌種為第0代),并采用適宜的菌種保藏技術進行保存,以保證試驗菌株的生物學特性。
金黃se/葡萄球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC(B)26 003〕
銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)〔CMCC(B)10 104〕
大腸埃希菌(Escherichia coli)〔CMCC(B)44 102〕
白色念珠菌(Candida albicans)〔CMCC(F)98 001〕
生孢梭菌(Clostridium sporogenes)〔CMCC(B)64 941〕
乙型副傷寒沙門菌(Salmonella paratyphi B)〔CMCC(B)50 094〕
2、菌液制備
2.1金黃se/葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養物置于TSA上或TSB中,30-35℃,培養18-24h。
2.2生孢梭菌的新鮮培養物置于FTM中,30-35℃,培養18-24h。
2.3白色念珠菌的新鮮培養物置于SDA上,20-25℃,培養2-3天。
2.4黑曲霉菌的新鮮培養物置于SDA上,20-25℃,培養5-7天,或直到活的豐富的孢子,用0.05%聚山梨酯的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉將孢子洗脫,然后,吸出孢子懸液至無菌試管內,用0.05%聚山梨酯的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉制成適宜濃度的菌懸液。
2.5菌液制備后若在室溫下放置,應在2小時內使用;若保存在2~8℃,可在24小時內使用。生孢梭菌孢子懸液可替代新鮮的菌懸液,孢子懸液可保存在2~8℃,在驗證過的貯存期內使用。
3、陰性對照
為確認試驗條件是否符合要求,應進行陰性對照試驗,陰性對照試驗應無菌生長。如陰性對照有菌生長,應進行偏差調查。