選擇生物緩沖液時要考慮的五件事
點擊次數:766 更新時間:2021-07-13
生物緩沖液通常由共軛堿和弱酸或共軛酸和弱堿組成,其中我司主要生產的有Tris、Hepes、Mops等等。緩沖液是一種有助于維持穩定的pH值的溶液,一項成功的研究必然有著選擇使用了正確的緩沖液。在下文,將給大家介紹選擇生物緩沖液時需要考慮的五個方面。
1、pKa值
由于大多數生物反應都會在6-8的pH值之間發生,因此選擇具有正確pKa值的緩沖液非常重要。在選擇緩沖液之前,有必要弄清楚該實驗適合的pH值水平。
如果在實驗過程中pH值可能會降低或升高,則重要的是選擇pKa高于或低于任何實驗開始時的最佳值的緩沖液。每個緩沖液都具有一定的pH范圍,在該范圍內它具有足夠的緩沖能力。緩沖液的pKa值應在所需pH值的一個pH范圍內。
2、水溶性
緩沖液的溶解度非常重要。大多數緩沖劑必須高度溶于水。并且還需要使它們在大多數有機溶劑中的溶解度降至最di。這很重要,因為大多數生物系統都會自然使用水作為溶劑。緩沖液的水溶性越大,則制備濃縮原液就越容易。重要的是要注意稀釋后,儲備溶液的pH值可能會改變。
3、鹽的影響
鹽會嚴重影響實驗的結果,因為大多數生物系統都容易受到鹽的影響??茖W描述了良好緩沖液的許多屬性,包括zui小化鹽效應的必要性。鹽可能會產生反應,從而引起并發癥并可能影響研究結果。但是,有時會在實驗過程中添加鹽以進行調整,以提高化合物的緩沖能力。
4、滲透
滲透是選擇生物緩沖液時的關鍵因素。緩沖液不應穿過任何細胞膜。如果緩沖區在單元格內堆積,則實際上可以更gai單元格。這有可能改變研究結果。良好的緩沖液不會在任何細胞器中積累。
5、離子強度
離子強度是一個需要認真考慮的因素。生物系統在緩沖液中具有很高的離子強度,可能會遭受嚴重的并發癥。根據專業文獻得知,離子強度是一個重要方面,因為緩沖液在實驗中不會對離子濃度產生重大影響。