原理
HiCrome ECC顯色培養(yǎng)基使用了HiVeg特別蛋白胨替代動(dòng)物源特別蛋白胨,使得培養(yǎng)基無(wú)BSE/TSE風(fēng)險(xiǎn)。該培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基,用于初步鑒定來(lái)自食品和環(huán)境樣品的大腸桿菌和其他大腸菌群(3)。
培養(yǎng)基含兩種顯色原。一種被大腸埃希菌的葡萄糖醛酸酶裂解,產(chǎn)生藍(lán)色至紫色菌落,另一種被大腸菌群的半乳糖苷酶裂解,產(chǎn)生玫瑰紅-粉色菌落(1,2)。HiVeg特別蛋白胨和酵母粉提供氮源物質(zhì)、維生素B和其他必要生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)素。乳糖提供可發(fā)酵的碳水化合物,中性紅為pH指示劑。磷酸氫二鈉和磷酸/二氫鉀為培養(yǎng)基的緩沖液。氯化鈉有助于維持滲透壓平衡。
使用前使培養(yǎng)基表面干燥。用0.1%的HiVeg蛋白胨水(貨號(hào)MV028)進(jìn)行1:5或1:10稀釋食品樣品并進(jìn)行樣品勻漿。將勻漿液0.5ml或1ml用無(wú)菌玻璃涂布棒涂布在瓊脂表面并在35-37°C孵育18-24小時(shí)。孵育結(jié)束后對(duì)藍(lán)/紫菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),并乘以稀釋因子。大腸埃希菌的數(shù)目以每g食品為單位報(bào)告。
培養(yǎng)基組成
成分
克/升
HiVeg特殊蛋白胨
5.00
酵母粉
3.30
乳糖
2.50
磷酸氫二鈉
3.50
磷酸/二氫鉀
1.50
氯化鈉
5.00
顯色混合劑
20.30
中性紅
0.03
瓊脂
15.00
終 pH (25°C) 6.8±0.2
配制
55.83克溶于1000 ml蒸餾水。輕輕加熱使培養(yǎng)基*溶解。15磅(121℃)高壓滅菌15分鐘。冷卻至50℃。混勻并傾注無(wú)菌平皿。培養(yǎng)基可能不透明,不過(guò)不影響其性能。
質(zhì)量控制
粉末外觀:淡粉色均一自由流動(dòng)粉末。
成膠性:結(jié)實(shí),相當(dāng)于1.5%瓊脂糖凝膠。
制備好的培養(yǎng)基的顏色和透明度:平皿內(nèi)為粉紅色不透明凝膠。
配比后的pH值:5.58%水溶液(5.58g干粉/100ml水溶液)配好后,pH值自動(dòng)為6.8 ± 0.2(25°C)。
培養(yǎng)反應(yīng)
35-37°C培養(yǎng)18-24小時(shí)后,觀察培養(yǎng)反應(yīng)
有機(jī)體
生長(zhǎng)
菌落顏色
大腸桿菌(ATCC 25922)
旺盛
藍(lán)/紫
肺炎克雷伯菌(ATCC 13883)
旺盛
玫瑰紅/粉紅
銅綠假單胞菌(ATCC 27853)
好-旺盛
稻草色