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熒光染料亮度排行匯總 遠慕新聞√
點擊次數:675 更新時間:2020-06-28

 熒光染料是細胞生物學等科學研究中*的重要工具,熒光濾色塊是熒光顯微鏡中至關重要的一個部件。我們大家在操作熒光染料亮度的時候,我們可以按照上面的比較方法去比較熒光染料的亮度,那么一般熒光染料亮度怎么進行比較?

 

       熒光染料的亮度可以用來比較不同熒光染料的熒光標記效果,通過陰性細胞群與陽性細胞群的熒光信號之間的關系來表示。但陰性細胞群的熒光信號受到信號強度、自發熒光、非特異性染色、儀器的電子噪聲等多個因素相關。

 

       熒光染料染色指數是陽性細胞群的平均熒光強度與陰性細胞群的平均熒光強度之差與陰性細胞群熒光強度標準差之間比值的一半。熒光染料染色系數只和抗體克隆與質量、熒光團純度與質量、熒光修飾比、激光線及其功率、長通和帶通濾光片、目的細胞等因素相關。

 

       熒光染料的染色指數與熒光染料的亮度呈正相關,也就是熒光染料亮度越高,染色系數也就高。

 

       DNA染料:

 

 

       圖1.用Cell Navigator™脂質液滴熒光測定試劑盒(Cat#22735)和Nuclear Green™LCS1(Cat#17540)染色的油酸處理過的HeLa細胞的熒光圖像。

 

染料名稱標記部位激光濾光片組亮度
DAPI(17510)DNA355 nmDAPI6
Nuclear Blue(17548)DNA355 nmDAPI6
Nuclear Green(17540)DNA488 nmFITC6
Nuclear Orange(17541)DNA488 nmCy36
Propidium Iodide(17515)DNA532 nmTexas Red3
Nuclear Red(17542)DNA633 nmCy5.56

 

       細胞增殖染料:

 

 

       圖2.用CytoTell™Green和CFSE進行的細胞增殖測定。在第0天,用CytoTell™Green或CFSE對Jurkat細胞(?2×106細胞/ mL)進行染色。在的那天,以1:1的比例連續通過細胞。在通過當天,在FITC通道中用ACEA NovoCyte 3000流式細胞儀測量熒光強度。連續幾代人以不同的顏色代表。

 

染料名稱功能激光濾光片亮度
CytoTell Blue(22251)增殖405 nmDAPI6
CFSE(22022)增殖488 nmFITC7
CytoTell Green(22253)增殖488 nmFITC7
CytoTell Orange(22257)增殖488 nmCy3/TRITC7
CytoTell UltraGreen(22240)增殖488 nmFITC7
CytoTell Red 590(22261)增殖561 nmCy37
CytoTell Red 650(22255)增殖633 nmCy57

       細胞活力檢測染料

 

 

       圖3.用CytoCalcein Violet 500(Cat#22013)染色的活HeLa細胞圖像。細胞核用Hoechst 33342(Blue,Cat#17535)染色。

 

染料名稱功能激光濾光片亮度
Calcein Blue(22006)細胞活力405 nmDAPI6
Calcein UltraBlue(21908)細胞活力405 nmDAPI6
CytoCalcein Violet 450(22012)細胞活力405 nmDAPI7
CytoCalcein Violet 500(22013)細胞活力405 nmFITC7
Calcein(22001)細胞活力488 nmFITC7
Calcein Orange(22008)細胞活力488 nmTRITC7
Calcein UltraGreen(21905)細胞活力488 nmFITC7
7-AAD(17501)細胞活力532 nmCy52
Calcein Red(21900)細胞活力561nmCy3/TRITC7
Calcein Deep Red(21902)細胞活力633 nmCy57

 

       熒光標記染料

 

       圖4.將 HeLa細胞與(Tubulin +)或不與(Tubulin-)小鼠抗微管蛋白一起孵育,然后與iFluor™488山羊抗小鼠IgG綴合物(綠色,左)或AlexaFluor®488山羊抗小鼠IgG綴合物(綠色,右)。細胞核用Hoechst 33342(藍色)染色。

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