初次做凋亡，一般按照試劑盒說明書做即可，但要附上陽性對照。根據(jù)結(jié)果進行對實驗過程調(diào)整。我個人認為試驗過程中tunel酶反應(yīng)的時間、過氧化氫的滅活時間、DAB染色時間、蘇木素復(fù)染時間、PBS浸洗時間等都可以通過上次試驗結(jié)果進行微調(diào)從而使試驗染色達到j(luò)ia
　　
　　菌膜測定方法：
　　1、將待測硅酸鹽玻璃試管或聚苯乙烯96孔板中的菌液小心地倒掉；　　
　　2、用自來水柔和地沖洗，將殘余的培養(yǎng)基及游離細胞洗去，倒置片刻，將殘留的液體滴干；　　
　　3、加入與發(fā)酵液（是培養(yǎng)基嗎？）等體積的結(jié)晶紫染色液，應(yīng)沒過細菌生物膜產(chǎn)生界面（生物膜產(chǎn)生界面在哪），輕柔振蕩，染色30min；　　
　　4、傾去染色液，用自來水柔和地沖洗1-2次，倒置片刻，將殘留的液體滴干；　　
　　5、加入與染色液等體積的脫色液（脫色液是什么啊？），輕柔振蕩，脫色15min；
　　6、將脫色液定容（如何定容？），用分光光度計測定吸光度，波長為570nm，記錄結(jié)果。
　　
　　弧菌生長曲線：　
　　1、以終濃度為102CFU/ml（如何制作一個這樣濃度的細菌？）分別接種各弧菌2216E培養(yǎng)基中，28℃靜置培養(yǎng)，每隔3小時取樣，用分光光度計測OD值，波長為600nm。

免疫組化染色影響因素

      影響免疫組化染色質(zhì)量的因素有很多，在實驗中應(yīng)注意組織的取材和固定，選擇質(zhì)量好的商品化抗體，恰當?shù)剡x擇和使用封閉和抗原修復(fù)手段，嚴格的技術(shù)操作和對照等。 
1。假陰性反應(yīng)可發(fā)生在： 
1) 組織內(nèi)待測抗原已被分解破壞，或抗原含量過低； 
2) 抗原被遮蓋，多由于醛類固定劑的使用，使組織中的大分子蛋白借醛鍵形成交聯(lián)而遮蓋待檢抗原； 
3) 抗體質(zhì)量不佳或稀釋度不當； 
4) 技術(shù)操作失誤等。 

2．假陽性反應(yīng)可發(fā)生在： 
1) 抗體與非待檢抗原發(fā)生交叉反應(yīng)，在使用多克隆抗體時易出現(xiàn)； 
2) 組織對抗體的非特異性吸附，特別是在有大片組織壞死或組織中有較多富于蛋白的液體時容易發(fā)生； 
3) 內(nèi)源性過氧化酶的作用，在脾臟、骨髓及一些炎性病變組織的染色中易出現(xiàn)；內(nèi)源性堿性磷酸酶的作用，特別是腸黏膜上皮和腎近曲小管的刷狀緣有高濃度的堿性磷酸酶，若處理不*，易出現(xiàn)假陽性結(jié)果； 
4) 判斷失誤，將腫瘤組織中殘留的正常組織的免疫組織化學陽性信號誤認為是腫瘤的染色反應(yīng)； 
5) 當腫瘤浸潤破壞正常組織時，使被破壞的正常細胞胞漿內(nèi)的可溶性蛋白釋放，后者被腫瘤細胞非特異吸附或吞噬，使瘤細胞出現(xiàn)該種抗原的陽性反應(yīng)；⑥外源性和內(nèi)源性色素的干擾。