一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點或顆粒生成。首先,要肉眼觀察培養基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養細胞生長的狀態,黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁.污染包括細菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:
(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘?。?/p>
(2)血清質量不好,反復凍融的結果;
(3)配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長;
(4)配制培養基的水質、容器不合格.可應用離心、過濾的方法去除這些黑點;
細胞培養中出現黑點或顆粒解決辦法:
1、如果小黑點有增殖趨勢,那么就有可能是污染了,需要處理;
2、如果小黑點沒有增殖趨勢,且不影響細胞生長,也不影響實驗的話,則可能是以下幾種情況。
a、是「黑膠蟲」,黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物,本身就存在爭議。有人認為是從血清中來的一種原蟲,也有人認為是細菌,或是真菌,也有人認為是血清中的蛋白的結晶?!负谀z蟲」可寄生于動物細胞,也可以生存于培養基中,依靠細胞和培養基中的營養為生,并隨細胞傳代而傳代?!负谀z蟲」與細胞競爭性生長,開始時對細胞并沒有什么影響,但當黑膠蟲的數量多到一定程度的時候, 細胞生長就會受到影響直至死亡,嚴重影響了科研活動的開展和進行。以前(這個至少是 10 年以前),很多實驗室在養細胞時用國產血清,那時的血清可能質量不過關,有所謂的「黑膠蟲」,但是也沒有明確的鑒定。但是現在的血清,即使國產的,如四季青等稍大點的廠家,產品里這種現象就少見了。
b、是細胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗運動。
c、是核糖體,也可能是雜質。
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