木瓜蛋白酶,又稱木瓜酶,是一種蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜中含有的一種低特異性蛋白水解酶,廣泛地存在于番木瓜的根、莖、葉和果實內(nèi),其中在未成熟的乳汁中含量豐富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸,屬于巰基蛋白酶,它具有酶活高、熱穩(wěn)定性好、天然衛(wèi)生安全等特點,因此在食品、醫(yī)藥、飼料、日化、皮革及紡織等行業(yè)得到廣泛應(yīng)用。
由木瓜的未成熟果實,經(jīng)提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工業(yè)上以粗制品的應(yīng)用為主。木瓜蛋白酶韻生產(chǎn)方法有三種,分別是直接熱風(fēng)烘干法、噴霧干燥法及膜分離凍干法。
直接烘干法
生產(chǎn)方法較簡單、快速,但生產(chǎn)出來的成品只是粗酶,雜質(zhì)多、色澤差且微生物超標(biāo),酶活力也較低,只有60萬~80萬單位/g。多為個體工廠采用,已不能滿足國內(nèi)食品質(zhì)量衛(wèi)生安全等。
噴霧干燥法
此法是先通過離心去除部分雜質(zhì)后再進行噴霧干燥,所生產(chǎn)出的成品酶活力相對高,達到100萬單位/g左右,雜質(zhì)相對也較少,色澤相對也較白。但產(chǎn)品噴霧時容易粘壁,酶活損失較大,水溶性相對也較差,而且酶活穩(wěn)定性也較差。
膜分離法
該生產(chǎn)方法不但避免了以上兩種方法的缺點,且生產(chǎn)過程衛(wèi)生安全,收率也高,所生產(chǎn)的成品酶活損失小,酶活力一般可達到280萬~350萬單位/g,gao可達400萬單位/g,且酶活穩(wěn)定性好,純度高,色澤潔白,細菌數(shù)低,嚴格操作可達到醫(yī)藥級別。
其提取工藝條件為超聲波功率300W,超聲處理時間200s,果漿質(zhì)量分數(shù)30%;經(jīng)超聲波強化提取,酶活力提高到原先的1.71倍;該酶在40℃以下,pH為5.4~6.0時酶活力相對穩(wěn)定;EDTA、Cys和維生素C對酶活力具有激活作用,CuS04和ZnCl2具有抑制作用,而KCl、NaCI、CaCl2、MgS04對酶活力的影響不大。
木瓜蛋白酶的分離純化工藝
采用初步采集處理,20%、40%硫酸銨分級沉淀、SP-sephadexC50柱色譜、羥基磷灰石柱色譜,從番木瓜乳汁中分離純化木瓜蛋白酶。可獲得比活為1184U/mg的純酶,活力回收率為55.79%,純度達到99.31%,為高純度的木瓜蛋白酶。