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大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒操作步驟
【信息說明】
中文名：大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒
別名：大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit
供應商：上海遠慕
規格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個月
樣本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存，操作簡便。
用途：用于測定血清，血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
【性能優點】
專一性強：抗原與抗體的免疫反應是專一反應，而免疫酶技術以免疫反應為基礎，所檢測的對象是抗原(或抗體)，使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
靈敏度高：由于抗體聯結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。
樣品易保存：經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩定，因此有利于樣品的保存。
【操作步驟】
1、加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2、棄去液體，甩干，每個孔中加入detection ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制)，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時。
3、棄去孔內液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。
4、每孔加hrp conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。
5、棄去孔內液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。
6、每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時，即可終止)。
7、每孔加終止液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
8、立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(od值)。應提前打開酶標儀電源，預熱儀器，設置好檢測程序。
9、實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。
【注意事項】
1、操作嚴格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。
2、試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
3、濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
4、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5、底物請避光保存。
6、試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準，使用雙波長檢測時，參考波長為630nm
7、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時必須注意安全。
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