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辛基-瓊脂糖凝膠 CL-4B參數(shù)說明
中文名：辛基-瓊脂糖凝膠 CL-4B
英文名：octyl -Sepharose CL-4B
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
凝膠類型：疏水層析填料
粒徑： 45-165μm
工作PH值：3-12
操作溫度：4-40℃
結(jié)構(gòu)成分：4%交聯(lián)瓊脂糖
包裝：25毫升/瓶，100毫升/瓶，大包裝
配基偶聯(lián)量：40μmol phenyl/ml 凝膠
保存條件：4℃
性狀：白色微球，凝膠狀，保存在20%酒精溶液中
應(yīng)用：疏水層析介質(zhì)，適合含芳香族配體蛋白純化，特別適合單抗的純化等。
辛基-瓊脂糖凝膠 H.P.說明
辛基-瓊脂糖凝膠 CL-4B操作步驟
1.乙醇浸泡：在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;
2.無鹽水浸泡：室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時，間隙攪拌，以保證凝膠的*溶脹，然后;
3.鹽酸浸泡：在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時，間隙攪拌，濾干，水洗只中性;
4.將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層;
5.上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
6.凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50cm以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制，脫鹽時高徑比為5：1即可;
7.洗脫方法：可以用無鹽水，也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化;
8.在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個柱體積，再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。
辛基-瓊脂糖凝膠 CL-4B操作注意事項
1、密封貯存于4°C-28°C(保存溶液為20%乙醇)，通風(fēng)、干燥的地方，不能冷凍;用過的柱子貯存于4°C(20%乙醇)。
2、在裝柱、使用和保存柱子的時候，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入。
3、在實驗過程中，請嚴(yán)格遵循產(chǎn)品說明書上的要求進(jìn)行操作。
4、本產(chǎn)品避免與氧化劑接觸;避免長時間暴露在空氣中。
5、保質(zhì)期：5年。
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