上海遠慕生物詳細講述羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF操作步驟,注意事項,參數說明等咨訊,本司現貨銷售動物血清,標準品對照品,ELISA試劑盒,培養基,抗體,抗原,化學試劑,生化試劑,染色液,瓊脂糖凝膠,葡聚糖凝膠,實驗耗材,其他試劑等,訂購!
羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF參數說明
中文名:羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF
英文名:CM Sepharose FF
供應商:上海遠慕
規格:100ml、500ml
凝膠類型:離子交換填料,弱酸型
結構成分:6%交聯瓊脂糖
粒徑: 45-165μm
配基基團:carboxymethyl(羧甲基)
總離子交換量:0.09-0.13mmol/g凝膠
工作PH值:6-10
操作溫度:4-40℃
性狀(以下信息僅供參考):含20%乙醇,底部為乳白色膠體。
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)適用于各種帶陽性電荷生物大分子的濃縮純化等。
保存:2~8℃
羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF
羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF操作步驟
1、裝柱
凝膠過濾介質的使用對裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進行檢驗。
以下過程為通用介質裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩定后將柱床壓緊,接好管路。讓所有的材料和試劑達到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。
選擇一根一定直徑的柱子,長約30~60cm,根據柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。不要劇烈攪動,以免攪壞微球。
將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務必使底端無氣泡。用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。
打開蠕動泵,讓緩沖液緩慢流過,使柱床穩定。用一個裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。
2、平衡
讓緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和pH不變。
3、上樣
樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理,再上樣。介質對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的,分子量大的先流出來。上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好。
4、洗脫
用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
5、再生
一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。
6、注意
在裝柱、使用和保存柱子的時候,始終要避免柱子流干氣泡進入。
羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF操作注意事項
1、密封貯存于4°C-28°C(保存溶液為20%乙醇),通風、干燥的地方,不能冷凍;用過的柱子貯存于4°C(20%乙醇)。
2、在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入。
3、在實驗過程中,請嚴格遵循產品說明書上的要求進行操作。
4、本產品避免與氧化劑接觸;避免長時間暴露在空氣中。
5、保質期:5年。
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