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Q-瓊脂糖凝膠HP使用方法_用途_注意事項_參數說明
點擊次數:3257 更新時間:2018-03-07

Q-瓊脂糖凝膠HP是將季銨基團鍵合在瓊脂糖微球上形成的一種強陰離子交換介質;有關Q-瓊脂糖凝膠HP的使用方法,參數說明等咨訊由上海遠慕生物提供,本司是家專業從事實驗試劑的供應商,咨詢更多試劑!

 

Q-瓊脂糖凝膠HP參數說明

中文名:Q-瓊脂糖凝膠HP

英文名:Q Sepharose HP

供應商:上海遠慕

規格:100ml、500ml

顆粒大小:34μm 

凝膠類型:離子交換填料,強堿型

基質:6% 交聯瓊脂糖凝膠

性狀:白色微球,凝膠狀,保存在20%酒精溶液中。

應用:利用離子交換作用,應用于蛋白等生物分子的精細純化等。

Q-瓊脂糖凝膠HP使用方法_參數說明_用途

Q-瓊脂糖凝膠HP

 

Q-瓊脂糖凝膠HP使用方法

1、乙醇浸泡:在室溫下,將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時,并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干。

2、無鹽水浸泡:室溫下,在無鹽水中充分溶脹24小時,間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹。

3、鹽酸浸泡:在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時,間隙攪拌,濾干,水洗只中性。

4、將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據裝柱要求一次性置入柱內,注意保持濕態裝柱,并避免柱內產生氣泡或斷層。

5、上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。

6、凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調整;脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關,柱高控制在40-50cm以下,過高的凝膠層會引起較大的反壓,應當盡可能避免。難分離物質要有一定柱高和流速控制,脫鹽時高徑比為5:1即可。

7、洗脫方法:可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化。

8、在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個柱體積,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。

 

Q-瓊脂糖凝膠HP注意事項

1、密封貯存于4°C-28°C(保存溶液為20%乙醇),通風、干燥的地方,不能冷凍;用過的柱子貯存于4°C(20%乙醇)。

2、在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入。

3、在實驗過程中,請嚴格遵循產品說明書上的要求進行操作。

 

Q-瓊脂糖凝膠HP用途

1、可用氫氧化鈉在位清洗;基質的親水特性保證在洗脫過程中減少細胞衍生雜質的非特異性吸附。

2、可用于蛋白質、核酸及多肽的離子交換制備。

 

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