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瓊脂糖凝膠CL-6B適用范圍
點擊次數(shù):1523 更新時間:2018-03-07

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瓊脂糖凝膠CL-6B參數(shù)說明

中文名:瓊脂糖凝膠CL-6B

英文名:Sepharose CL-6B

供應(yīng)商:上海遠慕

規(guī)格:100毫升/瓶,500毫升/瓶

粒徑:60-200µm

保存溫度:4-8℃

操作溫度:4-40℃

分離范圍:70,000-40 ×106

凝膠類型:凝膠過濾填料,凝膠層析介質(zhì)

性狀:本品為乳白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhì)

應(yīng)用:蛋白、大分子復(fù)合物、病毒、核酸、多糖的分離、分子量測定等

用途:親和層析介質(zhì)

瓊脂糖凝膠CL-6B適用范圍

瓊脂糖凝膠CL-6B

瓊脂糖凝膠CL-6B使用方法

1.乙醇浸泡:在室溫下,將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時,并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;

2.無鹽水浸泡:室溫下,在無鹽水中充分溶脹24小時,間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹,然后;

3.鹽酸浸泡:在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時,間隙攪拌,濾干,水洗只中性;

4.將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層;

5.上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);

6.凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱高控制在40-50cm以下,過高的凝膠層會引起較大的反壓,應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時高徑比為5:1即可;

7.洗脫方法:可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化;

8.在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個柱體積,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。

 

瓊脂糖凝膠CL-6B適用范圍

本產(chǎn)品具有高化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、高載量、好的機械性能、可在位清洗、多次重復(fù)使用等特點,非特異性吸附低,回收率高,適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn),適用于在pH工作范圍內(nèi)可形成負離子的生物大分子的分離純化,廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。

 

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