上海遠慕生物詳細介紹瓊脂糖凝膠CL-4B的操作步驟,注意事項及其他參數說明,我們現貨為客戶提供瓊脂糖凝膠CL-2B,瓊脂糖凝膠2B,葡聚糖凝膠 G-200,葡聚糖凝膠 G-100,瓊脂糖凝膠4FF,瓊脂糖凝膠6FF及其他糖凝膠系列,價格實惠,如有需要,歡迎訂購!
瓊脂糖凝膠CL-4B參數說明:
中文名:瓊脂糖凝膠CL-4B
英文名: Sepharose CL-4B
供應商:上海遠慕
規格:100ml、500ml
基質:4%
操作溫度:室溫
顆粒大小:45-165μm
配基密度:40μmol/mL
每毫升結合量:15-20mgHSA
瓊脂糖凝膠配基:正丁烷基n-Octyl
性狀:本品為乳白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質
應用:蛋白、大分子復合物、病毒、核酸、多糖的分離、分子量測定等
適用范圍:限于科研實驗,不作臨床
瓊脂糖凝膠CL-4B操作流程
瓊脂糖凝膠CL-4B操作步驟:
1、裝柱凝膠過濾介質的使用對裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進行檢驗。以下過程為通用介質裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩定后將柱床壓緊,接好管路。
2、平衡
讓緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和pH不變。
3、上樣
樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理,再上樣。
介質對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的,分子量大的先流出來。
上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好。
4、洗脫
用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
5、再生
一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。
6、注意
在裝柱、使用和保存柱子的時候,始終要避免柱子流干氣泡進入。
7、去熱源用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時或用0.1M的氫氧化鈉24小時。或用以下方法步驟去除:
a、2倍柱體積的70%乙醇;
b、2倍柱體積50mMTris-HClpH7.5;
c、1倍柱體積4M尿素;
d、3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1MNacl;以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。
瓊脂糖凝膠CL-4B注意事項:
1、不同配基的偶聯方法與上面類似,但是反應的條件例如:配基加入量,反應時間,反應溫度應根據配基的不同進行適當的調整;
2、可用碳酸鹽、硼酸鹽和磷酸鹽緩沖液做為偶聯緩沖液,但不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸的緩沖液。
3、產品應密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20%乙醇),通風、干燥、清潔的地方。
4、不能冷凍。
5、用過的柱子貯存在4℃(20%乙醇)。
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