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中文名:腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒(波氏比色法)
供應商:上海遠慕
規格:100T
分類:酶類檢測
保存:4℃,避光,6個月
用途:定量檢測血清、血漿、組織等樣品中的腺苷脫氨酶活性
說明:腺苷脫氨酶催化腺嘌呤核苷水解脫氫,產生銨離子;通過分光光度計檢測640nm處吸光度。
腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒(波氏比色法)
腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒(波氏比色法)檢測原理:
待測樣品中的ADA催化腺嘌呤核苷水解脫氨,產生次huang嘌呤核苷和銨離子,利用波氏顯色法,測定氨離子生成量;其反應公式為:腺苷+H2O→次huang嘌呤+NH3;通過分光光度計檢測處吸光度,根據計算公式可得ADA活力,100T試劑盒可測50個樣本;該試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒(波氏比色法)操作步驟:
1、準備樣品:
a、血漿,血清樣品:血漿,血清按照常規方法制備;可以直接用于本試劑盒的測定,凍存,用于ADA的檢測。
b、細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行勻漿,低速離心取上清,凍存,用于ADA的檢測。
c、高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的ADA,可以使用ddH2O稀釋。
d、(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續計算單位蛋白重量組織或細胞內的ADA含量。
2、稀釋標準品:用ddH2O準確稀釋氨氮標準(1mg/ml)至25μg/ml,即為氨氮標準工作液,4℃保存,備用。
3、ADA檢測:設置空白管,標準管,對照管,測定管,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產生氣泡;如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。
4、混勻,分光光度計處檢測吸光度值,比色杯光徑,以ddH2O調零,讀取各管吸光度值;一般應數小時內檢測完畢;酶活力高于上限者,應將樣品稀釋后重新測定,結果乘以稀釋倍數。
腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒(波氏比色法)注意事項:
1、稀釋樣品和研磨樣品所用水,均應為ddH2O,不可為普通的水。
2、如果采用單位,需在測得活力單位基礎上乘以1.19。
3、胸水標本經離心后取上清,置于4℃保存備用,ADA活性可穩定1周。
4、血清樣本應避免溶血,4℃保存3天。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
說明:
腺苷脫氨酶(Adenosine Deaminase,ADA)是嘌呤核苷代謝中重要的酶類,屬于一種巰基酶,每分子至少含2個活性巰基;ADA能催化腺嘌呤核苷轉變為次huang嘌呤核苷,再經核苷磷酸化酶作用生成次huang嘌呤,其代謝緩和終產物為尿酸;ADA廣泛分布于人體各組織中,以胸腺,脾和其他淋巴組織中含量zui高;而肝,肺,腎和骨胳肌等含量低。
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