豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒操作步驟
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中文名:豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒
別名:豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA kit
供應商:上海遠慕
規格:48t/96t
保存:2-8℃低溫保存
有效期:6個月
試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。
用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。
檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒性能優點
豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒優點:
1、準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900
2、靈敏度:zui低檢測濃度小于(參考說明書)
3、特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應
4、重復性:板內、板間變異系數均小于15%
5、貯藏:2-8℃,避光防潮保存
6、有效期:6個月
豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒操作步驟:
1、使用前,將豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2、根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4、甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5、每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6、甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7、每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8、取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9、在450nm波長處測定各孔的OD值。
豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒技術原理:
1、抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2、結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
3、酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
4、受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
5、此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
6、加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒注意事項:
1、試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7、底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8、加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
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