上海遠慕生物詳細為您介紹革蘭陽性菌裂解緩沖液用途,產品說明,注意事項,規格,產地及其他咨訊,本司銷售不同系列的緩沖液(堿性瓊脂糖凝膠電泳緩沖液(10×),堿性磷酸酶緩沖液(pH7.5),植物電穿孔緩沖液),溶液,染色液,DNA保護液,ELISA試劑盒,動物血清血漿,標準品對照品,化學試劑,生化試劑,蛋白質,氨基酸,維生素,中間體,實驗耗材,其他實驗試劑等,品種齊全,全程提供操作指導,咨詢更多產品詳情!
中文名:革蘭陽性菌裂解緩沖液
供應商:上海遠慕
規格:100ml
分類:核酸提取
保存:室溫,12個月
用途:裂解細菌(革蘭陽性菌)中提取RNA
組成:主要由Tris-HCl、EDTA、SDS、氯化鈉等組成,臨用前加入蛋白酶K。
適用范圍:限于科研實驗,不作臨床。
革蘭陽性菌裂解緩沖液說明:
分離純化完整的RNA對于分子生物學的下游實驗極其重要,也是進行基因表達分析的基礎。從革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細菌中提取RNA的方法需要蛋白酶消化和有機溶劑抽提去除蛋白質,核酸消化去除DNA。革蘭陽性菌裂解緩沖液主要由Tris-HCl、氯化鈉、SDS等組成,臨用前加入蛋白酶K至終濃度100μg/ml。
革蘭陽性菌裂解緩沖液操作步驟:
1、 取適量的革蘭陽性菌裂解緩沖液,加入蛋白酶K,待用。
2、 取10ml培養物,離心,棄上清。
3、 重懸菌體于含有蛋白酶K的革蘭陽性菌裂解緩沖液,在干冰或其他低溫中凍結。
4、 解凍并超聲30W 3次,溫育。
5、 進行酚氯FANG異戊醇等方法抽提。
革蘭陽性菌裂解緩沖液用途:
1.裂解都用到緩沖劑,只要在緩沖溶液pH范圍內,BPS、Tris都可以作為緩沖劑,氯化鈉的濃度直接影響到蛋白與蛋白之間的相互作用,一般濃度在0-1M之間。一般而言,氯化鈉濃度越高,越不利于蛋白之間結合。EDTA濃度一般在0-5mM,也是緩沖劑的主要成分,也是酶活性抑止劑,量大可使酶失活保護蛋白。表面活性劑是非常值得關注的,離子性表面活性劑的裂解效果zui強,兩性非離子性表面活性劑裂解效果次之。一般離子性表面活性劑的用量在0.01%-0.05%之間,兩性表面活性劑用量在0-10mM之間,非離子性表面活性劑用量在0.1%-0.2%之間。在裂解液中常用到表面活性劑有Tritonx-100、NP-40、脫氧膽酸鈉、肌氨酸鈉、SDS、CTAB等。
2.裂解液中還有一個很重要的成分——蛋白酶抑止劑,其作用是阻止蛋白酶對細胞組織的消化作用,使組織細胞受到*的保護。不同的蛋白酶需要不同的抑止劑,對其選擇相當重要,只有正確選擇,才能有效抑止蛋白的降解,使其維持原有的蛋白相互作用。
革蘭陽性菌裂解緩沖液注意事項:
1.如果每次的使用量很小,可以適當分裝后再使用;
2.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作;
3.對于使用后的廢棄物,不要或舊的試劑,應按照相關法律法規正當處理;
4.做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制;
?5.請遵循產品說明書進行嚴格操作。
標簽:,革蘭陽性菌裂解緩沖液