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豬基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測試劑盒說明書
點擊次數:1119 更新時間:2017-12-19

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中文名:豬基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒
中文別名:豬基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA Kit
供應商:上海遠慕
規格:48T/96T
產品保存:2-8℃,有效期6個月
銷售優勢:量大從優、質量保證。
特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。
用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
常見ELISA試劑盒:白介素、選擇素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子、干擾素、轉化生長因子、趨化因子、細胞因子受體、粘附分子、生長因子、凋亡因子等等。

豬基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測試劑盒說明書

 

豬基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測試劑盒組織結構
1.血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心35分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心60分鐘去除顆粒。
3.細胞上清液:1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘,取上清液。
5.保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

豬基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測試劑盒優點

1.、靈敏、特異的抗體;

2.穩定的重復性和可靠性;

3.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;

4.適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;

 

豬基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測試劑盒說明書技術原理
1.抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2.結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
3.酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
4.受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
5.此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
6.加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。

 

豬基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測試劑盒說明書操作步驟

1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。

2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。

3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。

4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。

8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。

9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實驗方案:

6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

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