α-羥丁酸脫氫酶(α-HBD)檢測(cè)試劑盒(速率微板法)說明書

中文名：α-羥丁酸脫氫酶(α-HBD)檢測(cè)試劑盒(速率微板法)

供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格：100T

分類：酶類檢測(cè)

保存：—20℃,避光,12個(gè)月

用途：又稱連續(xù)監(jiān)測(cè)法,定量檢測(cè)血清、血漿、組織等樣品中的α-羥丁酸脫氫酶活性

適用范圍：限于科研，實(shí)驗(yàn)，不作臨床。

α-羥丁酸脫氫酶(α-HBD)檢測(cè)試劑盒(速率微板法)檢測(cè)原理：

α-羥丁酸脫氫酶催化α-酮丁酸還原成α-羥丁酸,同時(shí)使NADH氧化成NAD+。酶標(biāo)儀檢測(cè)340nm處吸光度,監(jiān)測(cè)吸光度下降速率,進(jìn)而計(jì)算α-羥丁酸脫氫酶的活性。

α-羥丁酸脫氫酶(α-HBD)檢測(cè)試劑盒(速率微板法)操作步驟：

1， 編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2 孔、陽性對(duì)照2 孔、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）。

2，加樣：分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3，溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4，配液：將20倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用。

5，洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6，加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7，顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘。

8，終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

9，測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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α-羥丁酸脫氫酶(α-HBD)檢測(cè)試劑盒(速率微板法)注意事項(xiàng)：

1，底物請(qǐng)避光保存。

2，嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

3，所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

4，本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

5，為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。