葡聚糖凝膠G-200操作說明書

中文名：葡聚糖凝膠G200

中文別名：交聯葡聚糖凝膠 G-200；交聯右旋糖酐凝膠 G-200

英文名：Sephadex G-200；Cross-inked dextran gel G-200

供應商：上海遠慕

分離范圍：5000-600000

干顆粒直徑：40～120um 

分子量分級范圍：A.肽及球形蛋白質：5000～800000；B. 葡聚糖（線性分子）：1000～200000 

床體積毫升/克干分子篩：30～40ml/g 

得水值：20.0±2.0 

溶脹zui少平衡時間（h）：室溫72h（20℃）；沸水浴5h（90℃） 

柱頭壓力（kpa）(2.5cm直徑柱)：0.39～1.57 

PH：2～13 

性狀：白色珠粒，屬親水性凝膠。性穩定，不溶于水、弱酸和堿溶液，遇強酸能使糖苷鍵分解。 

用途：用于凝膠過濾，肽類分離、脫鹽，分子量測定。 

保存：RT  

適用范圍：本產品僅供科研使用！

葡聚糖凝膠G-200簡介：

葡聚糖凝膠G-200,白色珠狀顆粒。一種由葡聚糖經醚鍵相互交聯合成具有多孔性三度空間網狀結構的高分子分離材料，為穩定的親水性凝膠，G-10是表示G類凝膠吸水量的型號。可將G后的數字除以10即為該凝膠每克干重所吸水分的毫升數。能使一定分子量范圍的大分子進入凝膠的網狀結構內，不溶于水、鹽 分離和提純蛋白質、多糖、酶、核酸、激素、氨基酸、多酞和抗菌素等。薄層色譜支持物。

葡聚糖凝膠G-200操作流程：

1.乙醇浸泡

在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干。

2.無鹽水浸泡   

室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時，間隙攪拌，以保證凝膠的*溶脹。

3.鹽酸浸泡    

在常溫下再用0.1M HCl浸泡12小時，間隙攪拌，濾干，水洗只中性。

4.裝柱  

將溶脹好的凝膠根據裝柱要求一次性置入柱內，注意保持濕態裝柱，并避免柱內產生氣泡或斷層。

5.平衡  

上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩為止（流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值）。

6.上樣  

凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調整；脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關，柱高控制在40-50cm 以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應當盡可能避免。難分離物質要有一定柱高和流速控制，脫鹽時高徑比為5：1即可。

7.洗脫方法      

可以用無鹽水，也可以采用上柱時的緩沖液洗脫；在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化。

8.清洗      

每次用完之后，將柱子里的緩沖液置換為去離子水，然后用20%的乙醇封存。

9.在位清洗（CIP）      

凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個柱體積，再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。

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