質粒小量提取試劑盒I型，Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column說明書

上海遠慕生物代理不同系列的進口品牌試劑，美國Omega代理商，包含有：M-13單鏈DNA提取試劑盒，磁珠質粒超大量提取試劑盒，瓊脂糖凝膠回收試劑盒，超薄柱型PCR產物純化試劑盒，96孔過濾板，一次性多道移液槍分裝容器，1.2ml帶蓋固定圓底收集板。其他Omega系列，了解更多進口試劑，請！

名稱：質粒小量提取試劑盒I型

品牌：Omega

供應商：上海遠慕

型號：Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column

用途：從小于5ml培養過夜的細菌培養液中純化約35ug質粒DNA

Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column特性:
簡單-硅膠柱過濾操作
快速-在30分鐘內完成多個樣品的抽提工作
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美國Omega生物技術公司是一家專門從事核酸分離純化試劑盒研發與生產的企業，是一家zui早以硅膠膜純化為基礎的核酸純化公司之一，經過長期的不斷奮斗和創新，Omega公司在此基礎上已經發展出上百種的核酸純化試劑盒，包括了質粒提取、DNA/RNA純化、基因組DNA提取、RNA提取、mRNA純化。特別是在基因組DNA和RNA提取這兩個系統中，Omega根據不同材料的特殊性，發展出了一系列針對性相當強的試劑盒，如真菌，植物，昆蟲，軟體動物，土壤，糞便等樣品的DNA/RNA提取試劑盒，因而大大的方便了廣大的科研工作者。

Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column提取步驟：

 
1. 樣本處理收集已培養1216小時的菌液13ml12000rpm離心1分鐘，盡量吸除上清。          注：菌液較多時可以通過多次重復離心將菌體收集到1個離心管中。菌液收集量由菌濃而定收集菌體過多會反而降低裂解效果。 

2. 懸浮向菌體沉淀的離心管中加入250ul溶液Ⅰ用移液器反復吹打或渦旋振蕩器*懸浮細菌細胞沉淀。 

3. 裂解加入250ul溶液Ⅱ于細菌懸液中溫和地上下顛倒6~8次，使菌體充分裂解加1管混合1管確保溶液充分、及時的混勻。充分裂解后的菌液會變得相對粘稠為防止DNA斷裂避免劇烈混勻操作及裂解時間過長。 

4. 中和加入350ul溶液Ⅲ, 立即溫和上下顛倒6~8次充分混勻，加1管混合1管。此時會出現白色絮狀沉淀靜置2分鐘12000rpm離心5分鐘，可適當延長至10min。 
注：溶液Ⅲ加入后應立即混勻避免產生局部沉淀。若上清液中仍存在微小白色沉淀，可重復離心后取上清。 

5. 吸附小心地將上清液轉移至吸附柱中12000rpm離心30~60秒，棄收集管中廢液，然后將吸附柱重新套入廢液收集管中。若上清一次加不完，可重復操作轉移時不可吸入沉淀此步很重要。

6. 漂洗向吸附柱中加入600ul漂洗液PW使用前請檢查是否已加入無水乙醇，12000rpm離30~60秒。 

7. 重復步驟6棄收集管中廢液。

 
8. 將吸附柱套于收集管中，10000rpm離心2分鐘。

注:此步驟不可省略目的是去除吸附柱中殘余的漂洗液因為漂洗液中乙醇的殘留會影響后續實驗,酶切PCR等。

9. 洗脫將吸附柱置于一干凈的1.5ml離心管中向吸附柱膜中央部位懸空滴加50~100ul溶解液TE或滅菌雙蒸水，pH值在7.0-8.5，室溫靜置2~10分鐘，12000rpm離心2分鐘，即得提取質粒DNA于-20℃保存。

標簽：質粒小量提取試劑盒I型  Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column   質粒小量提取試劑盒