上海遠(yuǎn)慕生物詳細(xì)為您介紹人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒操作要求,注意事項,用途,特點,規(guī)格,型號,品牌,說明書等詳情,本司專業(yè)代理銷售進口/國產(chǎn)ELISA試劑盒,質(zhì)粒載體,溶液化學(xué)試劑,培養(yǎng)基,抗體,生化試劑,實驗耗材,染色液,標(biāo)準(zhǔn)品對照品,動物血清血漿,抗生素,其他試劑,提供ELISA試劑盒免費代測服務(wù),ELISA種屬涵蓋成千上萬,本司*活動下在進行中,訂購!
人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒操作要求詳細(xì)介紹:
中文名:人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒
別名:人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA Kit
供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
適用范圍:本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床。
用途:用于測定人血清,血漿,組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。
特點:靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好。
ELISA試劑盒種屬:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
本司ELISA試劑盒特性:
1、應(yīng)盡量選擇正規(guī)廠家,產(chǎn)品經(jīng)相應(yīng)政府部門審核認(rèn)可,試劑應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
2、靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
3、特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng),使測定結(jié)果升高,可能導(dǎo)致假陽性,所以交叉反應(yīng)是評價其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。
4、精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍。
5、準(zhǔn)確度:通過添加回收實驗進行評價。
6、簡便性:指在不影響試劑的前三項指標(biāo)的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性實驗中結(jié)果判斷簡單明了,定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單。
7、安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
8、經(jīng)濟性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進步降低成本,而市場價格比較合理。
9、試劑評價:需要有的確證方法和確證的樣品進行檢測。
人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒樣品收集、保存方法:
1、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA檢測試劑盒原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
標(biāo)本的處理:
(1)細(xì)胞培養(yǎng)上清液
根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。
(2)腦脊液
根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是5倍。
(3)血漿
①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分鐘,4℃,分離血漿樣品,然后儲存在零下80℃直到使用。
②用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液55倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質(zhì)影響檢測,按照說明書方法檢測。
人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒操作要求注意事項:
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實驗中不用的試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9)按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA檢測試劑盒適用領(lǐng)域:
1.免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位
2.研究抗酶抗體的合成
3.顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)
4.定量檢測體液中抗原或抗體成份
人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA檢測試劑盒性能:
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒組成:
1:預(yù)包被板: 96T/48T
2:酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3:標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4:EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5:標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6:顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7:終止液: 1N硫酸 12mL x 1
8:濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1