上海遠慕生物是家專業從事科研試劑的供應商,詳細為您介紹小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒用途,特點,品牌,操作說明書,注意事項,樣本要求等資訊,專業代理供應進口/國產ELISA試劑盒,質粒載體,動物血清血漿,標準品對照品,化學試劑,培養基,抗體,緩沖液,生化試劑,實驗耗材,其他試劑等,ELISA種屬包含:植物,馬,牛,兔,雞,大鼠,小鼠,人,豚鼠,犬,豬,羊及其他動物,提供免費代測服務,訂購!
中文名:小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
別名:小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA kit
供應商:上海遠慕
規格:48t/96t
保質期:6個月,所有試劑盒均提供批次。
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好。
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。
適用范圍:用于科研方面,不用于臨床診斷。可以用于檢測各種指標。
ELISA法定量測定大鼠血清、血漿、細胞培養物上清或其它相關液體中SOD含量。
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒標本的采集及保存:
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃ 后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA檢測試劑盒液體類標本:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/ 分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并 放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5)組織標本:
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA檢測試劑盒說明:
1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。
4.剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列數據在小試管中進行稀釋。
20nmol/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
10nmol/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
5nmol/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.5nmol/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.25nmol/L 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒用途注意事項:
1.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
2.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
3.保用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物a、b液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
4.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
5.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
8.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
9.底物a應揮發,避免長時間打開蓋子。底物b對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取od值。