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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
點(diǎn)擊次數(shù):1293 更新時(shí)間:2017-08-08

ELISA試劑盒,小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

上海遠(yuǎn)慕生物專(zhuān)業(yè)銷(xiāo)售ELISA試劑盒,小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū),進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒,培養(yǎng)基,抗體,細(xì)胞株,微生物,生物分子,蛋白質(zhì),動(dòng)物血清,標(biāo)準(zhǔn)品,化學(xué)試劑,生化試劑,實(shí)驗(yàn)耗材,染色液,詳細(xì)講述ELISA試劑盒相關(guān)的操作說(shuō)明書(shū),價(jià)格,品牌,注意事項(xiàng),規(guī)格,型號(hào)等詳情,種屬試劑盒包含大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,駱駝ELISA試劑盒,豬ELISA試劑盒,犬ELISA試劑盒,植物ELISA試劑盒,其他動(dòng)物種屬ELISA試劑盒,提供代測(cè)服務(wù),一周出結(jié)果,若有需要,歡迎訂購(gòu)!


中文名:小鼠ELISA試劑盒
別名:小鼠ELISA kit
英文名:Mouse ELISA Kit
供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8
有效期:6個(gè)月
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
用途:用于測(cè)定人血清,血漿,組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。
性能:敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性。
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
標(biāo)本因素;
試劑因素;
③操作因素。

小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒

 小鼠ELISA試劑盒 基本原理:
抗原或抗體能吸附到固相載體表面,并保持其免疫學(xué)活性;
抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,仍保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
③酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。

 

小鼠ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存:
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4過(guò)夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

 

ELISA試劑盒,小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)樣品收集、處理方法:
1、血清-----室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心
2、血漿-----應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心
3、細(xì)胞培養(yǎng)上清---檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清
4、組織標(biāo)本-----切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用
5、培養(yǎng)細(xì)胞----- 檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBSPH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

 

 

小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10 孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉,再各取50μl 分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl 棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為120 U/L ,80 U/L,40 U/L,20 U/L,10 U/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液:將30(48T 的20 倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T 的20 倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。測(cè)定應(yīng)在加終止

液后15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

小鼠ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

小鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3  各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請(qǐng)避光保存。
6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
9.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

 

ELISA試劑盒,小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)性能:
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900
2. 靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于(參考說(shuō)明書(shū))
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%
5. 貯藏:2-8,避光防潮保存。
6. 有效期:6個(gè)月。

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