酶標記物方法注意事項
點擊次數(shù):1388 更新時間:2017-05-17
上海遠慕生物詳解:酶標記物方法注意事項
酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗體和酶標記SPA等。酶標記物質量的好壞直接關系到免疫酶技術的成功與否,因此被稱為關鍵的試劑。酶標記物中zui常用的是酶標記抗體,它是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成。酶標記抗體的質量主要取決于純度好、活性強及親和力高的酶和抗體,其次要有良好的制備方法。目前,高質量的酶(如辣根過氧化物酶,簡稱HRP)國內(nèi)已有商品供應。高質量的抗體則可通過提取純化而獲得。在制備方法上,宜選用產(chǎn)率高、不影響結合物的活性和不混雜干擾性物質且操作簡便易行的方法。
注意事項
1. 在具備高質量HRP的條件下,所要標記的抗體也要活性高,效價高(zui低1∶16),純度高,親和力好,這是保證標記物效價高,免疫活性好的首要條件。
2. 所使用試劑的PH和濃度及用量必須嚴格掌握。所用試劑,(或必需)新鮮配制。如在戊二醛標記法中所用戊二醛應為新鮮純品,因戊二醛儲存過久可形成縮和體(雜質)。否則,影響標記效果。
3. 室溫攪拌時須避光,室內(nèi)溫度一般在25℃為宜。標記物每次透析前,須認真檢查,防止漏液。
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