糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒說明書

    一、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒簡介

    糖原染色是病理學中常規的染色方法之一，McManus在1946年zui先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白，該法常用來顯示糖原和其他多糖，該染色液不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質，以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。

    過碘酸（又稱高碘酸）是一種強氧化劑，它能氧化糖類及有關物質中的1，2-乙二醇基，使之變為二醛，醛與Schiff試劑能結合成一種品紅化合物，產生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細胞內其他物質，使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間，使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基，又不至于過氧化，這是很關鍵的步驟。

    本糖原PAS染色試劑盒的特點:采用Leagene*配方技術，大大增強了染色效果；性能穩定，特異性強；操作簡捷，僅需1h左右。

    二、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒組成

    試劑(A):過碘酸溶液50ml100ml500ml4℃避光

    試劑(B):SchiffReagent50ml100ml500ml4℃避光

    試劑(C):Lillie-Mayer蘇木素染色液50ml100ml500mlRT避光

    試劑(D):酸性乙醇分化液50ml100ml500ml

    三、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒主要成分：

    試劑(A):主要由過碘酸等組成。

    試劑(B):主要由堿性品紅、偏重亞硫酸鈉等組成。

    試劑(C):主要由蘇木素、乙醇等組成。

    試劑(D):主要由稀酸、乙醇等組成。

    自備材料：

    1、10%的福爾馬林

    蒸餾水或去離子水

    3、95%乙醇

    4、無水乙醇

    5、封片劑

    四、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒操作步驟（僅供參考）

    1、常規固定，常采用10%的福爾馬林，常規脫水包埋。

    2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水；冰凍切片直接入蒸餾水。

    3、自來水沖洗2～3min，再用蒸餾水浸洗2次。

    4、置于過碘酸溶液中，室溫放置5～8min，一般不宜超過10min.

    5、自來水沖洗1次，再用蒸餾水浸洗2次。

    6、樣本放入SchiffReagent，置于室溫陰暗處，浸染10～20min。

    7、自來水沖洗10min。

    8、樣本置于Lillie-Mayer蘇木素染色液中，染細胞核1～2min。

    9、酸性乙醇分化液分化。

    10、自來水沖洗10～15min后，更換雙蒸水清洗，使其返藍。

    11、逐級常規乙醇脫水。

    12、二甲苯透明。

    13、中性樹膠封固。

    五、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒染色結果：

    PAS反應陽性物質（糖原或多糖）紅色或紫紅色

    細胞核藍色

    細胞質深淺不一的紅色

    備注：顏色深淺很大程度上取決于樣品在過碘酸溶液和SchiffReagent中作用時間的長短。

    陰性對照(可選)：

    1、對照切片可以用唾液，取唾液片（過濾后用）處理30～60min后，與其他切片共同入過碘酸溶液。

    2、對照片可以淀粉酶，取淀粉酶1g于雙蒸水或PBS(pH5.3)100ml，處理30～60min后，與其他切片共同入過碘酸溶液。

    3、如果對照片采用其自身樣本，對照片不經過碘酸溶液這一步，直接入SchiffReagent。染色結果：對照片呈陰性反應，無紫紅色顆粒。

    六、注意事項：

    1、切片脫蠟應盡量干凈，否則影響染色效果。

    2、過碘酸氧化時間不宜過久，氧化時的溫度以18～22℃zuijia。

    3、試劑(A)、(B)應置于4℃密閉保存，使用時避免接觸過多的陽光和空氣。使用前，

    提前30min取出恢復到在室溫后，避光暗處使用。

    4、酸性乙醇分化液應經常更換新液，其分化時間應該依據切片厚薄、組織的類別和酸性乙

    醇分化液的新舊而定，另外分化后自來水沖洗時間應該足夠。

    5、在過碘酸溶液和SchiffSchiffReagent中作用時間非常重要，該依據切片厚薄、組織

    的類別等決定。

    6、本試劑盒常用于常規組織切片染色，對于真菌、細胞、極其薄的切片，建議采購糖原PAS染色試劑盒（細胞真菌）,因為其過碘酸溶液和蘇木素溶液濃度更低，不宜過染。7、冷凍切片染色時間盡量要短。

    8、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

    七、有效期：6個月有效。